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李暢0527鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
層析柱分離純化，懂得親們來幫幫忙啊 已有7人參與
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| 我將蛋白水解后應(yīng)該有很多不同分子量的肽，經(jīng)分子篩分離應(yīng)該有很多峰，可是為什么只出了一個穿透峰呢，明白的請幫我分析一下。我用的填料是葡聚糖凝膠G25，柱子是1.6*40cm的。上樣濃度是50mg/ml，不出峰是不是跟濃度有關(guān)系�。� |
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| 我最近也在做這方面的東西，根據(jù)你的情況說點我的觀點，希望對你有用。首先個人覺得你的樣品濃度有點高，本人也做過50mg/mL的濃度，分離效果很不好，25就很好，大部分博士碩士論文的濃度也是25；第二，您的問題中沒有提到流速，流速是影響分離效果的主 要因素，根據(jù)文獻(xiàn)和我自己做實驗的情況，我覺得0.5mL/min是比較合適的。第三，如其他人所說，你的柱子高度確實不高，柱子高度有點低。第四，還有可能就是你的多肽的分子量不在g25的分離范圍內(nèi)，你可以先做一下分子量分布，然后選擇合適的凝膠。第五，你的收集管的體積要盡量小，這樣你分開的峰才不會因收集量大而又混合在一起。希望對你有用。 |
14樓2014-04-23 09:47:24
ywlzwd
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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21樓2014-04-26 01:06:04
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