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李暢0527鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
層析柱分離純化,懂得親們來(lái)幫幫忙啊 已有7人參與
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| 我將蛋白水解后應(yīng)該有很多不同分子量的肽,經(jīng)分子篩分離應(yīng)該有很多峰,可是為什么只出了一個(gè)穿透峰呢,明白的請(qǐng)幫我分析一下。我用的填料是葡聚糖凝膠G25,柱子是1.6*40cm的。上樣濃度是50mg/ml,不出峰是不是跟濃度有關(guān)系啊? |
| 我最近也在做這方面的東西,根據(jù)你的情況說(shuō)點(diǎn)我的觀點(diǎn),希望對(duì)你有用。首先個(gè)人覺(jué)得你的樣品濃度有點(diǎn)高,本人也做過(guò)50mg/mL的濃度,分離效果很不好,25就很好,大部分博士碩士論文的濃度也是25;第二,您的問(wèn)題中沒(méi)有提到流速,流速是影響分離效果的主 要因素,根據(jù)文獻(xiàn)和我自己做實(shí)驗(yàn)的情況,我覺(jué)得0.5mL/min是比較合適的。第三,如其他人所說(shuō),你的柱子高度確實(shí)不高,柱子高度有點(diǎn)低。第四,還有可能就是你的多肽的分子量不在g25的分離范圍內(nèi),你可以先做一下分子量分布,然后選擇合適的凝膠。第五,你的收集管的體積要盡量小,這樣你分開(kāi)的峰才不會(huì)因收集量大而又混合在一起。希望對(duì)你有用。 |

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

專(zhuān)家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +248 |

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (知名作家)

銀蟲(chóng) (小有名氣)

鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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