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lrm407至尊木蟲 (著名寫手)
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[求助]
間接法免疫熒光細(xì)胞染色如何重新標(biāo)記熒光? 已有2人參與
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| 做免疫熒光細(xì)胞染色,用DAPI染細(xì)胞核,用抗體標(biāo)記檢測(cè)蛋白。放置一段時(shí)間后重新觀察,DAPI顏色還在,檢測(cè)蛋白的熒光消失,F(xiàn)打算重新用抗體標(biāo)記檢測(cè)蛋白進(jìn)行觀察,需要將之前標(biāo)記的抗體洗去再重新抗體標(biāo)記嗎?需要的話應(yīng)該怎么洗去之前的抗體?可否直接加一抗和二抗標(biāo)記觀察?謝謝! |
金蟲 (小有名氣)
| 你染完沒有加防淬滅劑嗎?最近也在做,放了三天,目的蛋白的熒光看了一下還在?篃晒獯銣绶馄河玫氖潜淘铺斓,大片子每次加10ul就夠了,覺得挺好的。如果目的蛋白熒光弱,DAPI最好少加并且時(shí)間短一些,DAPI太強(qiáng)容易影響目的蛋白熒光。還想請(qǐng)教你一個(gè)問題,我染DAPI的時(shí)候核不是一片藍(lán)而是一塊一塊的,你有沒有這種現(xiàn)象呢? |
至尊木蟲 (著名寫手)
金蟲 (小有名氣)
至尊木蟲 (文壇精英)
至尊木蟲 (著名寫手)
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