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lrm407至尊木蟲(chóng) (著名寫手)
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[求助]
間接法免疫熒光細(xì)胞染色如何重新標(biāo)記熒光？ 已有2人參與
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| 做免疫熒光細(xì)胞染色，用DAPI染細(xì)胞核，用抗體標(biāo)記檢測(cè)蛋白。放置一段時(shí)間后重新觀察，DAPI顏色還在，檢測(cè)蛋白的熒光消失�，F(xiàn)打算重新用抗體標(biāo)記檢測(cè)蛋白進(jìn)行觀察，需要將之前標(biāo)記的抗體洗去再重新抗體標(biāo)記嗎？需要的話應(yīng)該怎么洗去之前的抗體啊？可否直接加一抗和二抗標(biāo)記觀察？謝謝！ |
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kueradi
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lrm407(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-04-22 13:22:15
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| 你染完沒(méi)有加防淬滅劑嗎？最近也在做，放了三天，目的蛋白的熒光看了一下還在�？篃晒獯銣绶馄河玫氖潜淘铺斓模笃用看渭�10ul就夠了，覺(jué)得挺好的。如果目的蛋白熒光弱，DAPI最好少加并且時(shí)間短一些，DAPI太強(qiáng)容易影響目的蛋白熒光。還想請(qǐng)教你一個(gè)問(wèn)題，我染DAPI的時(shí)候核不是一片藍(lán)而是一塊一塊的，你有沒(méi)有這種現(xiàn)象呢？ |
2樓2014-04-22 12:12:18
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3樓2014-04-22 14:55:32
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5樓2014-04-23 11:15:46
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