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我愛科學(xué)2012木蟲 (正式寫手)
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[求助]
基因敲除中,陽性克隆抗生素最低致死濃度(即陽性克隆篩選濃度)的確定。。。。! 已有1人參與
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如題,本人在做酵母的基因敲除實驗,但是苦于對抗生素最低致死濃度的確定,不知道怎么確定。就是說對野生株某種抗生素(如G418,Zeocin等)最低致死濃度(就是后續(xù)的抗生素抗性篩選濃度),這個是怎么確定的? 我的做法是:將菌種挑取單菌落培養(yǎng)至對數(shù)期后,取100微升涂布在 幾個含抗生素濃度梯度的平板上面,之后放在30度培養(yǎng),沒有形成單菌落的平板對應(yīng)的抗生素濃度就是最低致死濃度,最后將此濃度作為后續(xù)的抗生素抗性篩選濃度。 不知道這樣做對不對?大家是怎么做的。謝謝各位的指教!。。。 ![]() ![]() |

新蟲 (初入文壇)
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