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songfei1989金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于反向ODS MCI的問題 大家發(fā)表一下意見，小弟跪謝。。。 已有1人參與
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1 ODS MCI 在每一次上樣的時(shí)候還要重新裝柱嗎 因?yàn)槊恳淮翁幚淼臉悠妨坎灰粯�，樣品少的時(shí)候就看不到了，樣品填料比是怎樣的。 2 每次接通一個(gè)比例組分的時(shí)候接幾瓶，水特別難處理，大家有沒有好的處理方法，怎樣將水旋出去的（傷泵）。 3 在上樣之前摸條件假如說在50%甲醇水的時(shí)候Merck反向板可以分開，是不是就在這個(gè)條件接柱子的時(shí)候用好多瓶子接，用MerckC18反向板摸得條件準(zhǔn)確嗎？ 4 ODS MCI都是裝在開放柱里的，與HPLC有什么區(qū)別，這種情況用鋼瓶加壓，多少M(fèi)pa合適？ 望各位大俠不吝賜教，金幣還可以追加。。。全部奉上，以及一些反向柱使用的注意事項(xiàng)，也可以寫上，小弟在此跪謝啦  |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
songfei1989: 金幣+10, ★有幫助 2014-06-23 11:38:05
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1.若是你的樣品很純的話，你上反相或者M(jìn)CI只是簡單的處理下色素什么的，那么建議你拆卸下來洗洗干凈，重裝；一般性的上反相或者M(jìn)CI柱，在上樣前認(rèn)真的用甲醇或乙醇，甚至丙酮沖洗至回收基本無物質(zhì)出來就可以了。 2.少量的上樣，可以用甲醇或乙醇溶解，可以向其中滴少量的水，根據(jù)樣品而定。 3.用MERK板摸索后，上開放柱最好濃度縮減5-10%。 4.與HPLC肯定是有區(qū)別的，一個(gè)算高壓，一個(gè)算中低壓的，分離度就不一樣的，而且用的填料，HPLC一般是5微米的，而ODS最常見的是40-60微米的。我們一般沖洗反相是用加壓的，就是使用魚尾泵，還有就是減壓，一般也就這兩種方法，用鋼瓶加壓一般不推薦啊 ，有危險(xiǎn)的！減壓最安全。 |
2樓2014-04-24 08:53:44
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3樓2014-04-24 13:04:16
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4樓2014-04-24 13:22:09
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1，建議每次都重裝，根據(jù)你的樣品量來裝相應(yīng)的填料，一般比例50~100:1吧，看你的分離度怎么樣分離度大可以上樣量大一點(diǎn)。 2，ODS建議梯度洗脫，如果等度的話建議0.5個(gè)柱體積一瓶。視具體情況作調(diào)整，可以接的更細(xì)一點(diǎn)。至于水的問題我們都用隔膜泵，能到很低的真空度，把水旋出去沒問題。 3，Merck板的分離效果很好，一般在那上邊能分開在一般地中壓或常壓柱上比較難分開。還得用制備的HPLC。 4，區(qū)別就是分離效果的差別，HPLC 5 μm，壓力大，用液相泵泵流動(dòng)相，一般的ODS是40μm，用中壓泵泵流動(dòng)相，分離度稍差一點(diǎn)。MCI想樹脂一樣，一般常壓走。不建議用鋼瓶加壓。 |
5樓2014-05-05 10:28:02
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