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[求助] 色譜中出現(xiàn)的問(wèn)題已有6人參與

本人最近在做HPLC 用的流動(dòng)相為甲醇和磷酸單獨(dú)用大黃素（用甲醇溶解的）走的時(shí)候大概在5分多鐘會(huì)出一個(gè)峰單獨(dú)用齊墩果酸走得時(shí)候大概在12分鐘多會(huì)出一個(gè)峰兩個(gè)混合在一起之后我用的210NM的波長(zhǎng) （齊墩果酸在210NM有最大的吸收），流動(dòng)相用的甲醇：磷酸=80 ：100 ，就只出現(xiàn)在5分多鐘有大黃素的峰而在12分鐘左右并不出現(xiàn)任何的峰，一直走到最后也沒(méi)有峰出現(xiàn) ，后來(lái)改成了甲醇為百分之88 和90的時(shí)候均出現(xiàn)了齊墩果酸的峰，個(gè)人覺(jué)得十分奇怪求解····HPLC用的是島津公司的

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1樓 2014-04-24 11:34:02

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忍者神龜2014

銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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qzqzss: 金幣+3, 感謝親的耐心回復(fù) 2014-04-26 21:49:50

1、流動(dòng)相描述不準(zhǔn)確。
2、流速、柱溫未提，也許齊墩果酸對(duì)溫度較敏感——那就需要加柱溫箱，并控制一個(gè)合適的溫度。
3、正如前面所說(shuō)，需要進(jìn)重復(fù)性，驗(yàn)證之前的保留時(shí)間是否準(zhǔn)確。

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6樓2014-04-24 16:52:09

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wyy080214

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qzqzss: 金幣+3, 感謝親的耐心回復(fù)，但是重復(fù)幾次還是這樣 2014-04-26 21:50:19

你的齊墩果酸保留較強(qiáng)，需要較大洗脫強(qiáng)度才能洗脫下來(lái)，重復(fù)做幾個(gè)，看看重現(xiàn)性

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2樓2014-04-24 11:49:05

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daisyzhangwei

木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

不曾來(lái)過(guò)……

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qzqzss: 金幣+1 2014-04-26 21:49:04

跟樓上說(shuō)的一樣，重復(fù)一下看看情況，另外，你的流動(dòng)相能說(shuō)明具體一點(diǎn)嗎，流動(dòng)相用的甲醇：磷酸=80 ：100 ，一般不會(huì)有人這樣描述的，是筆誤還是

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人生若只如初見(jiàn)...

3樓2014-04-24 14:20:47

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quminming

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qzqzss: 金幣+1 2014-04-26 21:49:18

流動(dòng)相描述確實(shí)有問(wèn)題，一般含鹽類的流動(dòng)相會(huì)描述為，比如：5%磷酸緩沖液：乙腈=50:50，
你的磷酸“100”是什么意思呢？

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4樓2014-04-24 14:32:21

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fagui168

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qzqzss: 金幣+1 2014-04-26 21:49:28

流動(dòng)相的描述讓人比較費(fèi)解？樓主需要再詳細(xì)說(shuō)明一下，還有就是同意一樓的說(shuō)法

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改變你不能改變的，適應(yīng)你不能適應(yīng)的

5樓2014-04-24 15:33:57

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7樓2014-04-25 13:53:03

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引用回帖:

3樓: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-04-24 14:20:47
跟樓上說(shuō)的一樣，重復(fù)一下看看情況，另外，你的流動(dòng)相能說(shuō)明具體一點(diǎn)嗎，流動(dòng)相用的甲醇：磷酸=80 ：100 ，一般不會(huì)有人這樣描述的，是筆誤還是

柱溫:30度流速1ml/min 流動(dòng)相甲醇:0.1%磷酸=80:20 不好意思之前寫(xiě)錯(cuò)了做了好幾次都是這樣郁悶

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引用回帖:

6樓: Originally posted by 忍者神龜2014 at 2014-04-24 16:52:09
1、流動(dòng)相描述不準(zhǔn)確。
2、流速、柱溫未提，也許齊墩果酸對(duì)溫度較敏感——那就需要加柱溫箱，并控制一個(gè)合適的溫度。
3、正如前面所說(shuō)，需要進(jìn)重復(fù)性，驗(yàn)證之前的保留時(shí)間是否準(zhǔn)確。

柱溫:30度流速1ml/min 流動(dòng)相甲醇:0.1%磷酸=80:20 不好意思之前寫(xiě)錯(cuò)了做了好幾次都是這樣郁悶

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9樓2014-04-25 13:54:27

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diweifenxi

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qzqzss: 金幣+3, 感謝親的耐心回復(fù)，我試試看··難道出峰晚就會(huì)出現(xiàn)那種峰不出來(lái)的情況？ 2014-04-26 21:52:17

一樓正解就是這個(gè)原因！要不把甲醇換成乙腈吧！我估計(jì)80:20的時(shí)候就可以了！

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10樓2014-04-26 10:47:12

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