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wm陽(yáng)光新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
提取片段太短 已有1人參與
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現(xiàn)在做黃水中DNA的提取，課提取出來(lái)的片段就在700-800bp，不能用于后續(xù)DGGE，請(qǐng)教在提取過(guò)程中怎么防止DNA片段的斷裂 DNA提取方法： 黃水預(yù)處理：40ml黃水（6000r/min離心10min)------沉淀用TE緩沖液洗滌------向沉淀中加5mlTE 1、取0.8ml預(yù)處理黃水加500ulDNA抽提液、40ul （50mg/ml）溶菌酶、10ul(20ug/ml）蛋白酶K，37度水浴30min 2、加200ul 20%的SDS，65度水浴2h，每隔15min，顛倒搖勻 3、6000r/min l離心10min收集上清 4、沉淀加入500ul抽提液和200ulSDS,65度水浴10min 5、6000r/min離心10min,收集上清，合并上清 6、加入等體積的酚：氯仿：異戊醇（25:24:1）搖勻，12000r/min離心10min,收集上清 7、向上清中加入酚：氯仿：異戊醇再抽提一次 8、加入0.6倍體積無(wú)水乙醇，4度沉淀1h 9、12000r/min離心10min,收集沉淀 10、遇冷的70%的乙醇洗滌沉淀，自然干燥 11、沉淀加50uiTE |
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z441229642 
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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2樓2014-05-13 15:51:25
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