版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號(hào)能夠正常使用，請(qǐng)盡快對(duì)帳號(hào)進(jìn)行手機(jī)號(hào)驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門版塊排行榜

北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

返回列表

guduyiyu

金蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 549.8
散金: 225
帖子: 383
在線: 225.1小時(shí)
蟲號(hào): 2038523
注冊(cè): 2012-09-30
性別: GG
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

[求助] pET-28a與pGEX-4T-1表達(dá)蛋白的區(qū)別已有4人參與

大神們，最近在做原核表達(dá)載體構(gòu)建，以及表達(dá)條件的篩選，用到了兩種載體，pET-28a與pGEX-4T-1，蛋白是胞內(nèi)蛋白，這兩種載體有什么區(qū)別嗎，哪一個(gè)作為表達(dá)載體更好一些？

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

招收生物學(xué)/細(xì)胞生物學(xué)調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)
300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二已經(jīng)有7人回復(fù)
070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
289求調(diào)劑已經(jīng)有13人回復(fù)
299求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分已經(jīng)有9人回復(fù)
081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)
調(diào)劑求院校招收已經(jīng)有5人回復(fù)
調(diào)劑310 已經(jīng)有8人回復(fù)
一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

雙順反子表達(dá)載體的構(gòu)建——求助！已經(jīng)有8人回復(fù)
pET-22b重組質(zhì)粒誘導(dǎo)表達(dá)的蛋白分子量偏�。� 已經(jīng)有4人回復(fù)
pET28a載體蛋白表達(dá)為包涵體已經(jīng)有5人回復(fù)
求指點(diǎn)用IPTG誘連接在pET28a上的蛋白表達(dá) 已經(jīng)有13人回復(fù)
請(qǐng)問pET30b這個(gè)載體在IPTG誘導(dǎo)后有沒有可能表達(dá)除了目的蛋白以外的其他蛋白？已經(jīng)有16人回復(fù)
原核表達(dá)載體構(gòu)建老不成功，求助！已經(jīng)有20人回復(fù)
pET-28a原核不能表達(dá)目的蛋白已經(jīng)有17人回復(fù)
目的蛋白序列連接pet15b測序結(jié)果正確為何不表達(dá) 已經(jīng)有7人回復(fù)
原核表達(dá) PET-30載體目的蛋白分子量偏�。� 已經(jīng)有18人回復(fù)
用過pET28a(+)表達(dá)載體的高人請(qǐng)指教已經(jīng)有31人回復(fù)
SDS-PAGE和PAGE的區(qū)別（SDS-PAGE測出來的一定就是蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量？）已經(jīng)有17人回復(fù)
蛋白質(zhì)固定吸附與蛋白質(zhì)分離純化的區(qū)別已經(jīng)有9人回復(fù)
【求助/交流】（引物設(shè)計(jì)）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影響目的基因的表達(dá)？已經(jīng)有9人回復(fù)
【求助/交流】如何提高PET表達(dá)系統(tǒng)的蛋白表達(dá)量已經(jīng)有22人回復(fù)
【求助/交流】連接表達(dá)載體PET-28A失敗原因已經(jīng)有23人回復(fù)
【求助/交流】原核表達(dá)載體pGEX-4T-1對(duì)應(yīng)的表達(dá)菌株已經(jīng)有6人回復(fù)

不努力永遠(yuǎn)不知道自己有多優(yōu)秀

1樓 2014-04-24 19:12:47

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

回帖支持 ( 顯示支持度最高的前 50 名 )

xiaoamuchong

專家顧問 (職業(yè)作家)

科研工作者

專家經(jīng)驗(yàn): +261
MicEPI: 3
應(yīng)助: 309 (大學(xué)生)
金幣: 7113
散金: 582
紅花: 87
沙發(fā): 8
帖子: 3151
在線: 745.7小時(shí)
蟲號(hào): 3130111
注冊(cè): 2014-04-12
專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
管轄: 微生物

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
dllchina: 金幣+2 2014-04-24 21:26:57

類型和抗性不一樣。pET-28a為組成型，抗kana，pGEX-4T-1為誘導(dǎo)型，抗Ampicillin。前者可以不經(jīng)誘導(dǎo)組成型表達(dá)某個(gè)基因，后者在經(jīng)過誘導(dǎo)物的誘導(dǎo)后才能表達(dá)某個(gè)基因；前者的優(yōu)點(diǎn)就是不要誘導(dǎo)可以一直穩(wěn)定的表達(dá)，這也決定了它的缺點(diǎn)，就是不能控制在何時(shí)表達(dá)某個(gè)基因，后者的優(yōu)點(diǎn)就是可以控制表達(dá)的時(shí)間，但是需要誘導(dǎo)物。哪個(gè)更好的話，得看用途了。

贊一下(3人)

回復(fù)此樓

曾經(jīng)有人問我為什么要學(xué)微生物，我只是想離生命的本質(zhì)更近一點(diǎn)。

2樓2014-04-24 19:51:04

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

普通回帖

guduyiyu

金蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 549.8
散金: 225
帖子: 383
在線: 225.1小時(shí)
蟲號(hào): 2038523
注冊(cè): 2012-09-30
性別: GG
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

引用回帖:

2樓: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-04-24 19:51:04
類型和抗性不一樣。pET-28a為組成型，抗kana，pGEX-4T-1為誘導(dǎo)型，抗Ampicillin。前者可以不經(jīng)誘導(dǎo)組成型表達(dá)某個(gè)基因，后者在經(jīng)過誘導(dǎo)物的誘導(dǎo)后才能表達(dá)某個(gè)基因；前者的優(yōu)點(diǎn)就是不要誘導(dǎo)可以一直穩(wěn)定的表達(dá)，這也 ...

首先謝謝你啊，但是我現(xiàn)在用pET-28a作載體，導(dǎo)入宿主菌后，做外源表達(dá)時(shí)，也要經(jīng)過IPTG的誘導(dǎo)啊，不誘導(dǎo)的話，蛋白表達(dá)水平特別的低，你所說的誘導(dǎo)是在表達(dá)外源蛋白時(shí)嗎？還是別的什么

贊一下

回復(fù)此樓

不努力永遠(yuǎn)不知道自己有多優(yōu)秀

3樓2014-04-27 16:37:33

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

lihuahan

銀蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 314.8
帖子: 44
在線: 41小時(shí)
蟲號(hào): 2795325
注冊(cè): 2013-11-12
性別: MM
專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)

【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

3樓: Originally posted by guduyiyu at 2014-04-27 16:37:33
首先謝謝你啊，但是我現(xiàn)在用pET-28a作載體，導(dǎo)入宿主菌后，做外源表達(dá)時(shí)，也要經(jīng)過IPTG的誘導(dǎo)啊，不誘導(dǎo)的話，蛋白表達(dá)水平特別的低，你所說的誘導(dǎo)是在表達(dá)外源蛋白時(shí)嗎？還是別的什么...

你好，我也在做原核表達(dá)載體構(gòu)建，想請(qǐng)教一下我現(xiàn)在知道目的基因的CDS序列，設(shè)計(jì)引物的時(shí)候應(yīng)該是根據(jù)ORF設(shè)計(jì)嗎？還有就是pET-22,28,30,32這幾個(gè)表達(dá)載體應(yīng)該怎么選擇尼？你們做的時(shí)候是手頭有哪個(gè)用哪個(gè)嘛？

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

贊一下

回復(fù)此樓

4樓2014-05-01 11:02:48

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

xavier1989

新蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 165.3
帖子: 31
在線: 73.7小時(shí)
蟲號(hào): 2618307
注冊(cè): 2013-08-27
專業(yè): 病原細(xì)菌與放線菌生物學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

標(biāo)簽不同，GEX是用GST標(biāo)簽純化，PET系列沒記錯(cuò)是HIS。
我自己表達(dá)的情況來看，GST標(biāo)簽純化的蛋白相對(duì)雜帶少一點(diǎn)

贊一下

回復(fù)此樓

5樓2014-05-01 12:27:19

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

872940890

鐵蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 15 (小學(xué)生)
金幣: 159.3
散金: 200
紅花: 1
帖子: 161
在線: 67.4小時(shí)
蟲號(hào): 1918398
注冊(cè): 2012-07-31
性別: GG
專業(yè): 畜牧學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

pgex表達(dá)后獲得可溶性蛋白的概率大一些

贊一下

回復(fù)此樓

我知道我得繼續(xù)努力！加油！

6樓2014-05-01 19:13:23

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

guduyiyu

金蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 549.8
散金: 225
帖子: 383
在線: 225.1小時(shí)
蟲號(hào): 2038523
注冊(cè): 2012-09-30
性別: GG
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

引用回帖:

4樓: Originally posted by lihuahan at 2014-05-01 11:02:48
你好，我也在做原核表達(dá)載體構(gòu)建，想請(qǐng)教一下我現(xiàn)在知道目的基因的CDS序列，設(shè)計(jì)引物的時(shí)候應(yīng)該是根據(jù)ORF設(shè)計(jì)嗎？還有就是pET-22,28,30,32這幾個(gè)表達(dá)載體應(yīng)該怎么選擇尼？你們做的時(shí)候是手頭有哪個(gè)用哪個(gè)嘛？
...

不是吧，ORF不是開放式閱讀框嗎，這不是蛋白表達(dá)時(shí)才才用的東西嗎，設(shè)計(jì)引物要在多克隆位點(diǎn)設(shè)計(jì)，目的片段要插入到多克隆位點(diǎn)啊，我在選擇載體上沒有絕對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)啊，我現(xiàn)在用的就是PET-28，我是沒有一個(gè)選擇的依據(jù)吧，其實(shí)這個(gè)問題也困擾著我，同樣也想請(qǐng)大神指點(diǎn)一下，共同進(jìn)步

贊一下

回復(fù)此樓

不努力永遠(yuǎn)不知道自己有多優(yōu)秀

7樓2014-05-03 13:32:07

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

lihuahan

銀蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 314.8
帖子: 44
在線: 41小時(shí)
蟲號(hào): 2795325
注冊(cè): 2013-11-12
性別: MM
專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)

【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

7樓: Originally posted by guduyiyu at 2014-05-03 13:32:07
不是吧，ORF不是開放式閱讀框嗎，這不是蛋白表達(dá)時(shí)才才用的東西嗎，設(shè)計(jì)引物要在多克隆位點(diǎn)設(shè)計(jì)，目的片段要插入到多克隆位點(diǎn)啊，我在選擇載體上沒有絕對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)啊，我現(xiàn)在用的就是PET-28，我是沒有一個(gè)選擇的依據(jù)吧 ...

恩恩，1.因?yàn)槲液笃谑且龅鞍准兓�，是不是就�?yīng)該根據(jù)ORF設(shè)計(jì)引物尼？還是把CDS序列告訴公司，直接讓他們?cè)O(shè)計(jì)并合成就可以？
2.還有一個(gè)問題就是雙酶切位點(diǎn)應(yīng)該怎么選擇尼？除了盡量共用緩沖液，目的基因不能含有相同的酶切位點(diǎn)，還有別的跟目的蛋白有關(guān)的要求嗎？

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

贊一下

回復(fù)此樓

8樓2014-05-03 18:36:44

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

lihuahan

銀蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 314.8
帖子: 44
在線: 41小時(shí)
蟲號(hào): 2795325
注冊(cè): 2013-11-12
性別: MM
專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)

【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

關(guān)于第一個(gè)問題，現(xiàn)在有cDNA的第一鏈，想直接設(shè)計(jì)并合成兩端帶有酶切位點(diǎn)的引物，直接合成兩端帶有酶切位點(diǎn)的目的基因~

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

贊一下

回復(fù)此樓

9樓2014-05-03 18:40:42

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

781055707

木蟲 (著名寫手)

應(yīng)助: 291 (大學(xué)生)
金幣: 3118.2
散金: 46
紅花: 19
帖子: 2030
在線: 579.3小時(shí)
蟲號(hào): 3046113
注冊(cè): 2014-03-13
性別: GG
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

pGEX-4T-1,樓主有這個(gè)質(zhì)粒嗎？能送我一些嗎？郵費(fèi)我自己出就好了，謝謝。

贊一下

回復(fù)此樓

采菊東籬下，悠然見南山。

10樓2015-03-16 16:38:56

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主 guduyiyu 的主題更新

返回列表

普通表情龍兔虎貓

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 289求調(diào)劑 +13	新時(shí)代材料 2026-03-27	13/650	2026-03-29 01:16 by 544594351
[考研] 2026年華南師范大學(xué)歡迎化學(xué)，化工，生物，生醫(yī)工等專業(yè)優(yōu)秀學(xué)子加入！ +3	llss0711 2026-03-28	5/250	2026-03-29 00:23 by MRMFYTL
[考研] 315求調(diào)劑 +4	akie... 2026-03-28	5/250	2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 311求調(diào)劑 +4	冬十三 2026-03-24	4/200	2026-03-28 13:17 by 唐沐兒
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +8	邱gl 2026-03-27	8/400	2026-03-28 12:42 by 唐沐兒
[考研] 283求調(diào)劑 +7	A child 2026-03-28	7/350	2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 材料277求調(diào)劑 +7	min3 2026-03-24	7/350	2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 339求調(diào)劑，想調(diào)回江蘇 +6	烤麥芽 2026-03-27	8/400	2026-03-28 10:40 by 烤麥芽
[考研] 085405 考的11408求各位老師帶走 +3	Qiu學(xué)ing 2026-03-28	3/150	2026-03-28 09:19 by 樂呵呵的追夢(mèng)人
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +6	kotoko_ik 2026-03-23	7/350	2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 324求調(diào)劑 +5	hanamiko 2026-03-26	5/250	2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 材料學(xué)碩，求調(diào)劑 6+5	糖葫蘆888ll 2026-03-22	10/500	2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 333求調(diào)劑 +6	wfh030413@ 2026-03-23	6/300	2026-03-26 22:45 by 學(xué)員8dgXkO
[考研] 材料與化工328分調(diào)劑 +6	。，。，。，。i 2026-03-23	6/300	2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 290分調(diào)劑求助 +3	吉祥止止陳 2026-03-25	3/150	2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +7	α____ 2026-03-22	9/450	2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 282求調(diào)劑 +3	wcq131415 2026-03-24	3/150	2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7	小羊睡著了? 2026-03-23	10/500	2026-03-25 02:24 by 清風(fēng)拂揚(yáng)。 m
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4	鮮當(dāng)牛 2026-03-24	4/200	2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[基金申請(qǐng)] 請(qǐng)教下大家 2026年國家基金申請(qǐng)是雙盲審嗎？ +3	lishucheng1 2026-03-22	5/250	2026-03-24 08:22 by gltch

24小時(shí)熱門版塊排行榜

[求助] pET-28a與pGEX-4T-1表達(dá)蛋白的區(qū)別 已有4人參與

» 猜你喜歡

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

【答案】應(yīng)助回帖

【答案】應(yīng)助回帖

【答案】應(yīng)助回帖

【答案】應(yīng)助回帖

【答案】應(yīng)助回帖

【答案】應(yīng)助回帖

[求助] pET-28a與pGEX-4T-1表達(dá)蛋白的區(qū)別已有4人參與

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助: