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關(guān)于大腸桿菌涂板(含氨芐)培養(yǎng)的問(wèn)題 已有5人參與
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我用新配的培養(yǎng)基和天根的氨芐(100mg/ml)涂板培養(yǎng)大腸桿菌,做了對(duì)照試驗(yàn),共5個(gè)板,2個(gè)不加氨芐,3個(gè)加氨芐,不加氨芐的一個(gè)直接涂的DH5α感受態(tài)細(xì)胞,一個(gè)涂的是以前長(zhǎng)出過(guò)并且連接轉(zhuǎn)化成功的菌;加氨芐的三個(gè)板一個(gè)還是直接涂感受態(tài)細(xì)胞(1號(hào)),一個(gè)是以前成功的菌(2號(hào)),還有一個(gè)是新轉(zhuǎn)化的菌(3號(hào))。培養(yǎng)16小時(shí),結(jié)果沒(méi)加氨芐的板都長(zhǎng)了大片的菌,這說(shuō)明培養(yǎng)基是正常的,而加了氨芐的板1號(hào)沒(méi)有,2號(hào)有大片的菌,跟沒(méi)涂氨芐的密度差不多,3號(hào)有零星的菌(4、5個(gè)吧),每個(gè)菌周圍有那種小的衛(wèi)星菌落。以前成功的菌和新轉(zhuǎn)化的菌都是之前涂板剩下的菌在涂板前活化了45min,感受態(tài)細(xì)胞是加了800ul培養(yǎng)基后活化45min。這個(gè)結(jié)果是不是說(shuō)明氨芐有問(wèn)題呢,還是我在做培養(yǎng)基的時(shí)候氨芐沒(méi)有加均勻,可是我加氨芐的時(shí)候培養(yǎng)基溫度還算合適,而且也混勻了。 請(qǐng)教各位出現(xiàn)這個(gè)現(xiàn)象是什么原因,我上周的時(shí)候用實(shí)驗(yàn)室自己配的氨芐的時(shí)候12小時(shí)就長(zhǎng)得很好了。這個(gè)12小時(shí)的時(shí)候菌落還比較小,時(shí)間長(zhǎng)了就有衛(wèi)星菌落。但是這個(gè)氨芐之前實(shí)驗(yàn)室其他人用過(guò)說(shuō)是還算正常,但也需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。 |
銀蟲(chóng) (小有名氣)

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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