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楊巖yer金蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于用Ellman法測巰基,在計算中出現(xiàn)負值是怎么回事 已有1人參與
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參考的方法如下: 取1mL在2.3.3.6中配制的豆?jié){溶液加入2.0mL的緩沖液1(每升溶液含10.4gTris,6.9g甘氨酸,1.2g EDTA,pH=8.0)或緩沖液2(每升溶液含10.4gTris,6.9g甘氨酸,1.2g EDTA,480g尿素,pH=8.0)后再加入0.02mL的Ellman試劑(0.2gDTNB溶于50ml緩沖溶液1中),25℃下保溫5min,采用可見分光光度計,在412nm處測定吸光值。實驗以不加豆?jié){,而加Ellman試劑為空白。巰基含量的測定= 73.53*A412*D/C , 式中A412為有DTNB存在時豆?jié){的吸光值減去無DTNB存在時豆?jié){的吸光值,D為稀釋倍數(shù),C為豆?jié){固形物含量 這是一篇文獻中測定巰基的方法,我也是按這個過程操作的,在計算過程中A412(有DTNB存在時豆?jié){的吸光值減去無DTNB存在時豆?jié){的吸光值)出現(xiàn)了負值,不知道有么有人知道可能是什么問題造成的呢,該怎樣處理這個問題,而且已經(jīng)重復(fù)做了試驗,確定不是操作失誤,會出現(xiàn)三四個負值,請問方法有什么可能存在的問題嗎?求大神解答啊 |
金蟲 (小有名氣)
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金蟲 (小有名氣)
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