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qq466344154金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助雞肝細胞的分離培養(yǎng) 已有1人參與
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先大體說下我的制作方法，雞肝取出后用5%雙抗反復(fù)多次清洗后，采用機械剪碎法，0.25%胰酶、0.01%EDTA、37度消化5min，后8層紗布過濾、離心，用含胰島素的無血清DMEM培養(yǎng)基制成肝細胞懸液，培養(yǎng)。 過程大體就這樣，但是培養(yǎng)24h了，完全沒有文獻說的肝細胞形態(tài)，而且好像還含有許多血細胞。請看下圖。前幾次用了含5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)，也是沒有效果。是不是我的制作方法不對？難道非要用灌流法么？我只需要能做2個培養(yǎng)瓶的細胞量就夠了。 請前輩們幫忙看看吧，在做不出來就不用畢業(yè)了，后續(xù)還有許多內(nèi)容要做，這連個細胞都沒整好。關(guān)鍵是雞肝取材太難了，每次都要等材料，一等就是半個多月沒了。圖片都是在高倍鏡下拍的。 WP_20140509_001.jpg WP_20140509_002.jpg WP_20140509_003.jpg WP_20140510_001.jpg WP_20140510_002.jpg |
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2樓2014-05-10 11:22:38
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