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心月之星新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
植物DNA 的提取與純化 已有1人參與
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| DNA粗提取后有很明顯的條帶,純化后看不到條帶,為什么 是不是說(shuō)明原來(lái)DNA溶液中全是蛋白質(zhì)和雜質(zhì) |
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新蟲(chóng) (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+4, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-05-15 16:38:24
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1、粗提，可能你是用的經(jīng)典酚氯仿法吧。不知道你有沒(méi)有加蛋白酶K，以及抽提次數(shù)，以及DNA析出的時(shí)候用的是乙醇有沒(méi)有加異丙醇。 2、純化是用的試劑盒么，還是二次沉淀？ 3、如果是試劑盒的話，它對(duì)大片段的吸附能力以及洗脫能力是有限的，一般都是些短片段。粗提的DNa分子量一般都比較打，所以可能你用試劑盒純化后的量比較少。當(dāng)然還跟你的操作和盒子有關(guān)系，比如溫度選擇，洗脫次數(shù)等。 4、如果你是二次沉淀。不排除你提出來(lái)的DNA很大部分是蛋白質(zhì)。如果加水溶解后黏糊糊的甚至是膠狀，恭喜你，提出來(lái)的全是多糖。 5、順便說(shuō)一句，提多糖的方法和提DNa的酚氯仿法基本是一樣的。 |
2樓2014-05-15 11:29:23
心月之星
新蟲(chóng) (初入文壇)
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3樓2014-05-15 16:30:00
心月之星
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4樓2014-05-15 16:39:40
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