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鴉米新蟲 (小有名氣)
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[交流]
有人在做BiFC嗎? 已有16人參與
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| 因?yàn)槲医谝鯞iFC,我們實(shí)驗(yàn)室之前沒有人做過,所以想請教曾經(jīng)做過的朋友一些問題,哪位做過可以交流一下嗎? |
分子生化實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)積累 |
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你好,我最近在做BiFC,陰性對照也有熒光,而且很亮很多,我得陰性對照是兩個空載體,請問這種情況你是怎么解決的,希望能幫我解答一下,謝謝 |
金蟲 (正式寫手)
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新蟲 (小有名氣)
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有背景熒光干擾很正常,有時候尤其是做擬南芥根,什么都不賺轉(zhuǎn)植物本身也有一定的熒光信號。我們的做法是建立了一個rBiFC系統(tǒng),在載體上單獨(dú)加上了一個RFP,這樣可以依靠RFP信號檢查農(nóng)桿菌侵染轉(zhuǎn)化效果,并用YFP/RFP比值表示結(jié)果,同時,添加一定的tag以便做western檢查表達(dá)水平。結(jié)合這些手段,可以有效抑制干擾并獲得可信結(jié)果。具體可以參考上面列出的文章。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |

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