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鴉米新蟲 (小有名氣)
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[交流]
有人在做BiFC嗎？ 已有16人參與
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| 因為我近期要做BiFC,我們實驗室之前沒有人做過，所以想請教曾經(jīng)做過的朋友一些問題，哪位做過可以交流一下嗎？ |
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你好，我最近在做BiFC，陰性對照也有熒光，而且很亮很多，我得陰性對照是兩個空載體，請問這種情況你是怎么解決的，希望能幫我解答一下，謝謝 |
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你們是轉(zhuǎn)的擬南芥原生質(zhì)體嗎？操作上有什么需要注意的嗎？ 4樓2014-06-05 08:25:54
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西門吹雪170: 金幣+3, 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵回帖交流 2014-06-07 10:10:13
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵回帖交流 2014-06-07 10:10:13
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有背景熒光干擾很正常，有時候尤其是做擬南芥根，什么都不賺轉(zhuǎn)植物本身也有一定的熒光信號。我們的做法是建立了一個rBiFC系統(tǒng)，在載體上單獨加上了一個RFP，這樣可以依靠RFP信號檢查農(nóng)桿菌侵染轉(zhuǎn)化效果，并用YFP／RFP比值表示結(jié)果，同時，添加一定的tag以便做western檢查表達(dá)水平。結(jié)合這些手段，可以有效抑制干擾并獲得可信結(jié)果。具體可以參考上面列出的文章。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
10樓2014-06-07 02:34:43
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