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陶盛昌木蟲 (正式寫手)
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多糖上DEAE-52纖維柱的洗脫液紫外的測定問題 已有2人參與
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各位蟲友,請教幾個問題: 先介紹下背景,提取的植物性多糖,過DEAE-52纖維柱,然后用水洗脫,流速1ml/min,每管接10ml,接收了100管,然后進行紫外測定。 1.洗脫下來的洗脫液進行苯酚硫酸法測定吸光度時,你具體是怎么操作的?取多少洗脫液,加多少硫酸和苯酚?這個是要摸索的還是怎么樣?有沒有一個什么原則?我以前測粗多糖時是取1ml供試品,加5%的苯酚1ml,搖勻,加硫酸5ml,在488nm下測吸光度。還有,測吸光度以后,你將吸光度多少的合并再一起濃縮?吸光度多少算太小,會棄去。 2.我取吸光度1.5以上的收集合并以后,用醇沉淀的方法得多糖,但上樣300mg的粗多糖用水洗脫下來的洗脫液用醇沉好像得不到沉淀,請問是一定要用冷凍干燥嗎?樣品太少是不是不適合用醇沉淀? |
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