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陶盛昌木蟲 (正式寫手)
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[求助]
多糖上DEAE-52纖維柱的洗脫液紫外的測(cè)定問題 已有2人參與
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各位蟲友，請(qǐng)教幾個(gè)問題： 先介紹下背景，提取的植物性多糖，過DEAE-52纖維柱，然后用水洗脫，流速1ml/min，每管接10ml，接收了100管，然后進(jìn)行紫外測(cè)定。 1.洗脫下來的洗脫液進(jìn)行苯酚硫酸法測(cè)定吸光度時(shí)，你具體是怎么操作的？取多少洗脫液，加多少硫酸和苯酚？這個(gè)是要摸索的還是怎么樣？有沒有一個(gè)什么原則？我以前測(cè)粗多糖時(shí)是取1ml供試品，加5%的苯酚1ml，搖勻，加硫酸5ml，在488nm下測(cè)吸光度。還有，測(cè)吸光度以后，你將吸光度多少的合并再一起濃縮？吸光度多少算太小，會(huì)棄去。 2.我取吸光度1.5以上的收集合并以后，用醇沉淀的方法得多糖，但上樣300mg的粗多糖用水洗脫下來的洗脫液用醇沉好像得不到沉淀，請(qǐng)問是一定要用冷凍干燥嗎？樣品太少是不是不適合用醇沉淀？ |
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