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康熙61金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
雙向電泳提取蛋白質(zhì)的方法 已有2人參與
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我是最近才開(kāi)始做雙向電泳的，做了幾次效果都不理想。分析主要原因是提取蛋白時(shí)蛋白損失過(guò)多�，F(xiàn)在求助大家是否提蛋白較好的方法。 我主要做的標(biāo)本是組織還有細(xì)胞 處理細(xì)胞的方法： 1.用PBS洗細(xì)胞3次。 2.加入裂解液4℃裂解25min(裂解液 7M尿素，2M硫脲 ，4%DTT，CHAPS 4-5ul) 3.冰上超聲破碎10min 4.4℃ 14000rpm 離心10in 5.取部分上清測(cè)定蛋白濃度、 組織的提取方法 本人覺(jué)得不大好，就不寫(xiě)出來(lái)了。 希望大家能多給我提供幾種提蛋白的方法，最好是做雙向電泳時(shí)用的提蛋白的方法。 |
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康熙61
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2樓2014-06-17 11:54:44
梁青
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康熙61
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6樓2015-04-11 19:20:58
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