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surgrass銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
使用熒光分光光度計出現(xiàn)的怪事!
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我正在用ThT(硫磺素)檢測一種多肽的聚集過程,這中間,多肽會形成β-片層結(jié)構(gòu),和ThT結(jié)合,發(fā)出熒光。這些是文獻和書中說的。我做出來的結(jié)果完全不符合這些。首先文獻中報道隨著時間延長,基本在半個月左右,熒光會逐漸增加,達到一個近似平臺的程度。我的結(jié)果卻忽高忽低,沒有一個穩(wěn)定的趨勢。其次,我看到一篇文,說用溶劑做對照,我就試了試,結(jié)果,溶劑對照(不含ThT)比含ThT的樣品還要高。有的時候,ThT對照也比樣品的高。并且不管有沒有加ThT,在應該出峰的485nm處都有一個較高的峰,其他地方?jīng)]有。這一點太奇怪了! 我檢測時分別用了波長模式下EX、EM兩種模式和時間掃描模式。儀器是Hitachi的FL-2500。不知大家是怎么做的。 |
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