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zmj521good鐵桿木蟲 (小有名氣)
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[求助]
表達載體轉(zhuǎn)農(nóng)桿菌后的基因丟失問題 已有2人參與
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各位大俠，本人最近遇到一些怪事，我構(gòu)建好表達載體后，轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌C58C1，在相應(yīng)抗生素板上挑取單克隆，菌液PCR后，可以檢測到表達載體的抗生素基因，也可以檢測到載體的某一固定片段，但是唯獨檢測不到構(gòu)建到表達載體上的目的基因。之前，先從大腸桿菌中提取的質(zhì)粒即這個表達載體，多對引物檢測都沒問題，目的基因也在。不知是不是在轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的過程中載體上的目的基因丟失了？有沒有這個可能呢？ 求解啊，先謝謝啦！ |
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2樓2014-06-24 20:27:04
zmj521good
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8樓2014-06-27 14:41:59
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