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kjchao0316新蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白質(zhì)純化活性問題
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| 目前純化一重組蛋白,是以包涵體形式表達,菌體破碎清洗后收集包涵體,SDS-PAGE顯示純度在90%以上,用2M NaOH溶解,膠題金檢測有活性,用8M尿素溶解上His柱,流穿和洗脫都沒有活性。之后用8M尿素溶解后,稀釋復(fù)性,溶液渾濁,離心有沉淀,但是上層溶液有目的條帶,并且有活性,過柱會影響活性么?還是尿素會影響? |
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