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[求助]
如何鑒別DEAE-sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 已有1人參與
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| 實(shí)驗(yàn)室有一個柱子的填料，時間放久了沒貼標(biāo)簽，是DEAE-sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 中的一種，但是不能確定，有沒有鑒別的方法，求大神幫忙鑒別下 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhr0708(99503102代發(fā)): 金幣+15, 謝謝應(yīng)助！希望繼續(xù)關(guān)注食品版噢！ 2015-10-09 16:16:10
zhr0708(99503102代發(fā)): 金幣+15, 謝謝應(yīng)助！希望繼續(xù)關(guān)注食品版噢！ 2015-10-09 16:16:10
| 兩種填料的不同點(diǎn)就是一個含有DEAE配基，一個不含配基，含有配基的填料為弱陰離子交換樹脂，可以吸附帶負(fù)電荷的蛋白，而另一不帶配基填料不會吸附帶負(fù)電荷的蛋白。找到兩者區(qū)別就可以設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：取一些細(xì)胞，破碎后離心收集上清（緩沖液pH略高些），將其分成兩份，分別向其中加入等量的上述兩種填料，之后離心收集填料，再講填料放在少量1M氯化鈉溶液中，離心收集上清，之后測OD280值，OD值兩者差別較大，OD高的那個填料就是DEAE-sepharose。 |
2樓2015-10-09 15:16:18
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