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zhr0708

金蟲 (正式寫手)

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[求助] 如何鑒別DEAE-sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 已有1人參與

實(shí)驗(yàn)室有一個(gè)柱子的填料，時(shí)間放久了沒貼標(biāo)簽，是DEAE-sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 中的一種，但是不能確定，有沒有鑒別的方法，求大神幫忙鑒別下

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1樓 2014-07-09 17:16:32

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追夢(mèng)de蝸牛

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zhr0708(99503102代發(fā)): 金幣+15, 謝謝應(yīng)助！希望繼續(xù)關(guān)注食品版噢！ 2015-10-09 16:16:10

兩種填料的不同點(diǎn)就是一個(gè)含有DEAE配基，一個(gè)不含配基，含有配基的填料為弱陰離子交換樹脂，可以吸附帶負(fù)電荷的蛋白，而另一不帶配基填料不會(huì)吸附帶負(fù)電荷的蛋白。找到兩者區(qū)別就可以設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：取一些細(xì)胞，破碎后離心收集上清（緩沖液pH略高些），將其分成兩份，分別向其中加入等量的上述兩種填料，之后離心收集填料，再講填料放在少量1M氯化鈉溶液中，離心收集上清，之后測(cè)OD280值，OD值兩者差別較大，OD高的那個(gè)填料就是DEAE-sepharose。

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2樓2015-10-09 15:16:18

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