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nieqiantina銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
我的蛋白電泳圖，這樣的，求高手指導(dǎo)。 已有7人參與
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兩邊的marker每次都是歪的，都向外面傾斜，藍(lán)色的沒跑成一條直線，且一邊快一邊慢，是由于膠的濃度不均勻的原因嗎，那怎么才能均勻。謝謝�。。。� 20140710_171139.jpg |
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youlinglyw: 金幣+5, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，生物科學(xué)有你更精彩！ 2014-07-10 22:53:40
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電泳條帶歪斜，一般是因?yàn)椋?br />
1.凝膠制備不好，導(dǎo)致膠的密度或交聯(lián)程度不均勻。 2.點(diǎn)樣孔傾斜，全都往一個(gè)方向偏，可能是梳子插入時(shí)就插傾斜了。 3.可能凝膠的底部與玻璃板接觸的面上可能有氣泡。 4.凝膠制備時(shí)可能沒有在凝膠未聚合前保持水平或靜止，導(dǎo)致凝膠厚度不一致。 |
2樓2014-07-10 18:20:22
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3樓2014-07-10 22:35:46
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4樓2014-07-10 22:37:08
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7樓2014-07-14 14:25:02
【答案】應(yīng)助回帖
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電泳條帶歪斜，一般是因?yàn)椋?br />
1.您的凝膠制備不均勻，您不用太擔(dān)心凝固，只要不早加引發(fā)劑就行，制膠時(shí)，加入藥品后要用槍吹打，注意不要出現(xiàn)氣泡。 2.插梳子時(shí)要平穩(wěn)，不用太擔(dān)心，膠不會(huì)一瞬間就凝，慢慢來 3.其次，您在制版時(shí)可能操作不當(dāng)，導(dǎo)致膠面與板面出現(xiàn)氣泡，您加膠時(shí)，在一處加入就行，不用來回走動(dòng)槍。加水時(shí)，勿在一處加，盡量多加些水，這樣分離膠與濃縮膠的面就較平整。 4.凝膠制備時(shí)可能沒有在凝膠未聚合前保持水平或靜止，導(dǎo)致凝膠厚度不一致。 5、你可以對(duì)制膠時(shí)用的藥品，進(jìn)行超聲除氣泡，交聯(lián)劑、引發(fā)劑就不用了，因?yàn)橛昧可?br /> 6、建議您看看一些國外實(shí)驗(yàn)視頻，這在優(yōu)酷、愛奇藝，以及生物幫上都有 |
8樓2014-07-14 22:59:12
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9樓2014-07-24 13:01:29
【答案】應(yīng)助回帖
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呵呵，樓主的情況，我前天剛碰到過。樓上說的都有道理，不過我認(rèn)為我的情況都不是樓上說的情況。我開始也以為是主要是膠制作的問題。但是，因?yàn)槲业膬蓧K膠是面對(duì)面一起跑電泳的，跑的時(shí)候溴酚藍(lán)卻是在同一側(cè)傾斜，所以膠應(yīng)該沒問題。 這個(gè)情況明顯是一邊電流大，一邊電流小。所以明顯是電泳液或者電泳裝備等的某個(gè)因素出了問題，導(dǎo)致這個(gè)情況。后來重新清洗了遍裝備，電極什么的也換了下接口，就好了。感覺這個(gè)現(xiàn)象很偶然。因?yàn)橹霸O(shè)備都沒啥問題。 |
10樓2014-07-24 15:03:19
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