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[求助] SDS-PAGE電泳圖條帶分析

做電泳的實(shí)驗(yàn)很多次都這樣，求助！萬(wàn)分感激！
做了很多次為什么下面都會(huì)有一條線(xiàn)呢？
而且不出現(xiàn)條帶。感覺(jué)拖尾很?chē)?yán)重似的。

我進(jìn)的樣品是茶葉中的粗蛋白(需要分離的目標(biāo)組分分子量大概是在30K到50K)，左邊的MARKER（2K到100K）。濃縮膠5%，分離膠12%。跑電泳的時(shí)間大概是2個(gè)小時(shí)左右。

未命名.jpg

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1樓 2013-06-05 20:03:22

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BellZhu

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amisking: 回帖置頂 2013-06-07 20:25:50

應(yīng)該是溴酚藍(lán)形成的，大小應(yīng)該在10kD到20kD之間，跟你的上樣量有關(guān)，不過(guò)影響不大

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5樓2013-06-06 09:17:54

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stevenshi021

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amisking: 回帖置頂 2013-06-07 20:25:51

我個(gè)人認(rèn)為是你的膠沒(méi)有做好，你的marker都沒(méi)有走出個(gè)膠樣，更何況你的樣品呢！最好檢查一下你的buffer的pH，6.8-8.8.

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6樓2013-06-06 09:59:59

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zdwxxw

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1.你的膠做的不好，Marker都沒(méi)跑好，確認(rèn)一下你的膠濃度是否合適。
2.那條線(xiàn)是溴酚藍(lán)指示劑造成的，一般影響不大。
3.你的樣品沒(méi)有條帶，最大的可能是沒(méi)有提出來(lái)蛋白，可以換一下其他的提取液（主要是pH差異）試試看。

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踏踏實(shí)實(shí)做好自己，其他的事與你無(wú)關(guān)。

10樓2013-06-07 17:00:54

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cicelyzh

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你說(shuō)的線(xiàn)應(yīng)該是溴酚藍(lán)指示劑前沿。至于樣品為什么沒(méi)有帶，應(yīng)該是樣品的問(wèn)題，因?yàn)閙arker的條帶還算正常。你樣品的上樣量是多少微克蛋白？

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2樓2013-06-06 02:58:09

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crystal9002

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那條底部藍(lán)色的帶子我也見(jiàn)過(guò) 不影響結(jié)果你load了多少sample？會(huì)不會(huì)是濃度太低看不出來(lái)？

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3樓2013-06-06 03:37:55

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mitocam

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蛋白質(zhì)會(huì)不會(huì)降解了？

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4樓2013-06-06 05:37:01

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songzuowei

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我也認(rèn)為是你的膠制的不行，還有下面那條線(xiàn)就是溴酚藍(lán)，你不用管它，我經(jīng)常出現(xiàn)這種情況

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7樓2013-06-06 12:10:28

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你這沒(méi)有條帶吧，好像沒(méi)蛋白呀。

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8樓2013-06-06 13:52:08

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linxt2005

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電泳緩沖液是什么情況？新的還是舊的，更換一下試試。

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小兵一個(gè)

9樓2013-06-06 16:51:37

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