應(yīng)夢賢臣

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[求助] SDS-PAGE電泳圖條帶分析

做電泳的實驗很多次都這樣，求助！萬分感激！
做了很多次為什么下面都會有一條線呢？
而且不出現(xiàn)條帶。感覺拖尾很嚴重似的。

我進的樣品是茶葉中的粗蛋白(需要分離的目標組分分子量大概是在30K到50K)，左邊的MARKER（2K到100K）。濃縮膠5%，分離膠12%。跑電泳的時間大概是2個小時左右。

未命名.jpg

12.jpg

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1樓 2013-06-05 20:03:22

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cicelyzh

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你說的線應(yīng)該是溴酚藍指示劑前沿。至于樣品為什么沒有帶，應(yīng)該是樣品的問題，因為marker的條帶還算正常。你樣品的上樣量是多少微克蛋白？

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2樓2013-06-06 02:58:09

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crystal9002

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那條底部藍色的帶子我也見過不影響結(jié)果你load了多少sample？會不會是濃度太低看不出來？

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3樓2013-06-06 03:37:55

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mitocam

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蛋白質(zhì)會不會降解了？

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4樓2013-06-06 05:37:01

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BellZhu

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應(yīng)該是溴酚藍形成的，大小應(yīng)該在10kD到20kD之間，跟你的上樣量有關(guān)，不過影響不大

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5樓2013-06-06 09:17:54

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stevenshi021

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我個人認為是你的膠沒有做好，你的marker都沒有走出個膠樣，更何況你的樣品呢！最好檢查一下你的buffer的pH，6.8-8.8.

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6樓2013-06-06 09:59:59

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songzuowei

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我也認為是你的膠制的不行，還有下面那條線就是溴酚藍，你不用管它，我經(jīng)常出現(xiàn)這種情況

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7樓2013-06-06 12:10:28

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你這沒有條帶吧，好像沒蛋白呀。

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8樓2013-06-06 13:52:08

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linxt2005

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電泳緩沖液是什么情況？新的還是舊的，更換一下試試。

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小兵一個

9樓2013-06-06 16:51:37

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zdwxxw

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1.你的膠做的不好，Marker都沒跑好，確認一下你的膠濃度是否合適。
2.那條線是溴酚藍指示劑造成的，一般影響不大。
3.你的樣品沒有條帶，最大的可能是沒有提出來蛋白，可以換一下其他的提取液（主要是pH差異）試試看。

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踏踏實實做好自己，其他的事與你無關(guān)。

10樓2013-06-07 17:00:54

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