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厚德求是木蟲(chóng) (著名寫手)
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[求助]
定點(diǎn)飽和突變方法求助 已有2人參與
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求助!![]() 問(wèn)題正如題目所說(shuō),本人課題涉及蛋白質(zhì)工程,目前為止由定點(diǎn)突變技術(shù)尋找到幾個(gè)對(duì)正向突變點(diǎn),F(xiàn)在希望對(duì)其進(jìn)行定點(diǎn)飽和突變,以期找到更好突變效果。 但是實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有過(guò)有類似工作經(jīng)歷的人,所以想跪求各位有過(guò)類似試驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的蟲(chóng)友指點(diǎn)一二,大概問(wèn)題主要有: 1,如何設(shè)計(jì)引物,是否和定點(diǎn)突變引物設(shè)計(jì)類似,希望隨機(jī)突變的堿基用什么來(lái)表示? 2,PCR體系如何建立,關(guān)鍵是用什么酶? 3,Protocol如何設(shè)置,退火溫度是否要和引物的Tm相關(guān)聯(lián),退火和延伸時(shí)間分別是多少? 兄弟真的是第一次做,如果問(wèn)了無(wú)知問(wèn)題還請(qǐng)大俠包含~ |
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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鐵蟲(chóng) (初入文壇)

木蟲(chóng) (著名寫手)
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