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厚德求是木蟲 (著名寫手)
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[求助]
定點飽和突變方法求助 已有2人參與
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求助！ 問題正如題目所說，本人課題涉及蛋白質(zhì)工程，目前為止由定點突變技術(shù)尋找到幾個對正向突變點�，F(xiàn)在希望對其進行定點飽和突變，以期找到更好突變效果。 但是實驗室沒有過有類似工作經(jīng)歷的人，所以想跪求各位有過類似試驗經(jīng)驗的蟲友指點一二，大概問題主要有： 1，如何設(shè)計引物，是否和定點突變引物設(shè)計類似，希望隨機突變的堿基用什么來表示？ 2，PCR體系如何建立，關(guān)鍵是用什么酶？ 3，Protocol如何設(shè)置，退火溫度是否要和引物的Tm相關(guān)聯(lián)，退火和延伸時間分別是多少？ 兄弟真的是第一次做，如果問了無知問題還請大俠包含~ |
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