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厚德求是木蟲 (著名寫手)
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[求助]
定點(diǎn)飽和突變方法求助 已有2人參與
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求助！ 問題正如題目所說，本人課題涉及蛋白質(zhì)工程，目前為止由定點(diǎn)突變技術(shù)尋找到幾個(gè)對(duì)正向突變點(diǎn)。現(xiàn)在希望對(duì)其進(jìn)行定點(diǎn)飽和突變，以期找到更好突變效果。 但是實(shí)驗(yàn)室沒有過有類似工作經(jīng)歷的人，所以想跪求各位有過類似試驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的蟲友指點(diǎn)一二，大概問題主要有： 1，如何設(shè)計(jì)引物，是否和定點(diǎn)突變引物設(shè)計(jì)類似，希望隨機(jī)突變的堿基用什么來(lái)表示？ 2，PCR體系如何建立，關(guān)鍵是用什么酶？ 3，Protocol如何設(shè)置，退火溫度是否要和引物的Tm相關(guān)聯(lián)，退火和延伸時(shí)間分別是多少？ 兄弟真的是第一次做，如果問了無(wú)知問題還請(qǐng)大俠包含~ |
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xl249848
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厚德求是
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4樓2014-07-15 18:53:57
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