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厚德求是木蟲 (著名寫手)
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[求助]
定點飽和突變方法求助 已有2人參與
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求助!![]() 問題正如題目所說,本人課題涉及蛋白質(zhì)工程,目前為止由定點突變技術(shù)尋找到幾個對正向突變點,F(xiàn)在希望對其進行定點飽和突變,以期找到更好突變效果。 但是實驗室沒有過有類似工作經(jīng)歷的人,所以想跪求各位有過類似試驗經(jīng)驗的蟲友指點一二,大概問題主要有: 1,如何設計引物,是否和定點突變引物設計類似,希望隨機突變的堿基用什么來表示? 2,PCR體系如何建立,關(guān)鍵是用什么酶? 3,Protocol如何設置,退火溫度是否要和引物的Tm相關(guān)聯(lián),退火和延伸時間分別是多少? 兄弟真的是第一次做,如果問了無知問題還請大俠包含~ |
木蟲 (著名寫手)

銅蟲 (小有名氣)
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