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protein780鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
內(nèi)毒素干擾實(shí)驗(yàn)，有些不理解，求組各路朋友幫忙解惑。 已有2人參與
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1.藥典上說(shuō)用未檢查出內(nèi)毒素的供試品稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，我的樣品從未做過(guò)檢測(cè)，怎么可能知道是否含有內(nèi)毒素呢？ 2.我跳過(guò)干擾實(shí)驗(yàn)直接做凝膠限量實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)樣品在最大稀釋范圍與鱟試劑反應(yīng)時(shí)仍未陽(yáng)性，這個(gè)怎么排除是否是因?yàn)橛懈蓴_增強(qiáng)的因素呢？ 3.抗體類藥物在生產(chǎn)時(shí)內(nèi)毒素最大限值是多少呢？有的說(shuō)10EU/劑量，是這樣的嗎？ 4.干擾實(shí)驗(yàn)的原理是什么呢？“通過(guò)比較鱟試劑與內(nèi)毒素在水溶液和供試品溶液中反應(yīng)的差異程度，來(lái)確定供試品在該濃度下是否對(duì)BET檢查有干擾”，這一說(shuō)法，我不太明白，供試品里面肯定會(huì)有一部分內(nèi)毒素的呀，再加入標(biāo)準(zhǔn)品，肯定會(huì)增加呈現(xiàn)陽(yáng)性的概率。 |
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是的 藥典上有明確規(guī)定，你看下操作規(guī)程，上面有明確說(shuō)明，鱟試劑靈敏度使用0.03或者更低的時(shí)候，需要做熱原。0.25的太高了 你試試0.06的看看不行再說(shuō)，還有你看下你的鱟試劑廠家，你最好用湛江或者湛江安度斯的 廈門(mén)的不是很推薦，那個(gè)鱟試劑現(xiàn)在做的不好，我們江蘇這里省所基本上都不用廈門(mén)那家的了，都是推薦安度斯。你再試試，查查文獻(xiàn)再，PH是沒(méi)問(wèn)題的。實(shí)在0.06的也做不了又干擾，你還只能去做熱原 這也沒(méi)辦法 |
protein78010樓2014-07-28 18:06:56
protein780
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2樓2014-07-25 12:28:16
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protein780: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-07-25 17:12:05
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1、個(gè)人認(rèn)為，這個(gè)“未檢查出內(nèi)毒素的供試品稀釋標(biāo)準(zhǔn)品”指的是：在做干擾實(shí)驗(yàn)之前，肯定會(huì)做相應(yīng)干擾預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定供試品的合適濃度，而在此濃度下的供試品，用你確定的鱟試劑實(shí)驗(yàn)之后是不會(huì)有陽(yáng)性反應(yīng)的。也就是，此濃度的供試品，內(nèi)毒素含量應(yīng)是在你定的限值以內(nèi)的； 2、你做供試品陽(yáng)性反應(yīng)了嗎？如果做了，陽(yáng)性反應(yīng)不是陽(yáng)性的話，才能證明你的供試品對(duì)結(jié)果是有干擾的。你可以檢測(cè)一下PH值，看是否在合適的PH值范圍內(nèi)，像枸櫞酸、組氨酸等等的PH干擾都很大； 3、內(nèi)毒素限值是根據(jù)藥典上的公式算出來(lái)的，如果覺(jué)得藥典上的限值過(guò)大，可參考同類產(chǎn)品的內(nèi)毒素限值，個(gè)人認(rèn)為，嚴(yán)格一些是好事。并不是所有的抗體類藥物的內(nèi)毒素限值都是10EU/劑量； 4、這個(gè)就是一個(gè)回收實(shí)驗(yàn)。檢查一下你選擇的供試品濃度是否對(duì)鱟試劑反應(yīng)無(wú)干擾。一般 |
3樓2014-07-25 14:28:04
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4樓2014-07-25 17:02:30
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