| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2878 | 回復(fù): 2 | ||
ccrr110111銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
求助真菌細(xì)菌顯微鏡觀察常用染色劑 已有1人參與
|
| 除了常用的革蘭氏染色法,還有哪些染色劑可以觀察細(xì)菌、真菌的?(尤其是真菌的染色劑) |
銀蟲 (小有名氣)
|
希望對你有幫助! (一)高碘酸-無色品紅(PAS)法 1.試劑配制 (1)0.5%高碘酸水溶液: 高碘酸0.5g 蒸餾水100ml 溶解后,用小口砂塞瓶盛裝, 置于4℃冰箱保存。使用前取出恢復(fù)至室溫。 (2)0.5%偏重亞硫酸鈉液: 偏重亞硫酸鈉0.5g 蒸餾水100ml 溶解后,用小口砂塞瓶盛裝, 置于4℃冰箱保存。使用前取出恢復(fù)至室溫。 (3)無色品紅液(Schiff試劑): 堿性品紅1g 蒸餾水200ml 1N鹽酸20ml 偏重亞硫酸鈉1~1.5g 活性炭1~1.5g 取一只500ml的潔凈三角燒瓶盛蒸餾水200ml并煮沸,將堿性品紅加入煮沸的蒸餾水中,搖動數(shù)分鐘使堿性品紅完全溶解(此時溶液為深紅色);待溶液冷卻至50℃時,過濾至另一只潔凈三角燒瓶內(nèi),加入1N鹽酸20ml;待溶液冷卻至25℃左右時,再加入偏重亞硫酸鈉,隨即用膠塞塞緊瓶口,并輕輕搖動使其溶解,此時堿性品紅液的顏色明顯變淡。將溶液置于室溫、暗處24h,此時溶液應(yīng)呈淡稻草黃色或淡紅色。加入活性炭粉,攪勻后,塞瓶口輕搖1~2min,靜置1~2h;然后,將溶液通過雙層濾紙過濾到小口砂塞瓶內(nèi),此時溶液應(yīng)完全無色,即為無色品紅,又稱Schiff液,置于4℃冰箱內(nèi)保存。 (4)亮綠水溶液: 亮綠0.2g 蒸餾水99.8ml 冰醋酸0.2ml 2.染色程序 (1)組織塊固定于4%中性甲醛液中,常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。 (2)切片脫蠟至水。 (3)0.5%高碘酸氧化5~8min。 (4)流水沖洗2min,再用蒸餾水洗。 (5)入無色品紅液,于暗處并加蓋作用10~20min。 (6)0.5%偏重亞硫酸鈉液滴洗2次,每次約1min。 (7)流水沖洗5min。 (8)亮綠水溶液復(fù)染數(shù)秒。 (9)稍水洗。 (10)常規(guī)脫水、透明,中性樹膠封固。 3.染色結(jié)果 真菌呈品紅色,組織呈綠色。 (二)六胺銀法 1.試劑配制 (1)8%鉻酸水溶液: 鉻酸8g 蒸餾水100ml (2)0.5%偏重亞硫酸鈉液: 偏重亞硫酸鈉0.5g 蒸餾水100ml (3)5%硝酸銀溶液: 硝酸銀250mg 蒸餾水5ml (4)3%六次甲基四胺水溶液: 六次甲基四胺3g 蒸餾水100ml (5)5%四硼酸鈉液: 四硼酸鈉5g 蒸餾水100ml (6)六胺銀貯備液: 5%硝酸銀水溶液5ml 3%六次甲基四胺水溶液100ml 將3%六次甲基四胺水溶液加入5%硝酸銀溶液中,隨即形成白色沉淀;此沉淀在搖動中立即溶解。取澄清液置于4℃冰箱內(nèi)保存,可在數(shù)月內(nèi)使用。 (7)六胺銀工作液: 六胺銀貯備液10ml 蒸餾水25ml 5%四硼酸鈉液2ml 將5%四硼酸鈉液加入蒸餾水中,然后加入六胺銀貯備液,攪拌混合后即可使用。 (8)1%氯化金水溶液: 氯化金1g 蒸餾水100ml 先配制上述1%氯化金液貯存,另用蒸餾水與原液按9∶1稀釋成0.1%氯化金液。 (9)2%硫代硫酸鈉液: 硫代硫酸鈉2g 蒸餾水100ml (10)亮綠水溶液: 亮綠0.2g 蒸餾水100ml 冰醋酸0.2ml (11)橙黃G染液: 橙黃G2g 蒸餾水100ml 磷鎢酸5g 2.染色程序 (1)組織塊固定于4%中性甲醛液中,常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。 (2)切片脫蠟至水。 (3)8%鉻酸水溶液氧化20min。 (4)自來水稍洗。 (5)5%偏重亞硫酸鈉液處理1min。 (6)流水沖洗5min,再用蒸餾水洗2次。 (7)置入六胺銀工作液于溫箱內(nèi)(58~60℃)60~90min,至切片呈黃褐色,即在顯微鏡下觀察,見真菌呈黑褐色為止。 (8)蒸餾水洗。 (9)滴入0.1%氯化金溶液調(diào)色2~3min。 (10)流水稍洗。 (11)2%硫代硫酸鈉液處理2~5min。 (12)流水沖洗5min。 (13)用亮綠液復(fù)染20~40s,或用橙黃G復(fù)染1~2s。 (14)快速水洗。 (15)95%乙醇和無水乙醇脫水。 (16)二甲苯透明,中性樹膠封固。 3.染色結(jié)果 各種真菌均被著色。菌絲和孢子呈明顯的黑褐色,抗酸桿菌也呈黑褐色。背景為淡綠色(用亮綠復(fù)染時)或橙黃色(用橙黃G復(fù)染時)或紅色(用伊紅復(fù)染時)。 (三)愛先藍(lán)(alcian blue)法 1.試劑配制 (1)愛先藍(lán)水溶液(pH2.5): 愛先藍(lán)1g 蒸餾水97ml 冰醋酸3ml 麝香草酚50mg (2)核固紅液:參見網(wǎng)狀纖維染色“(一)氫氧化銀氨液浸染法(Ⅰ)”。 2.染色程序 (1)組織固定于4%中性甲醛液中,常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。 (2)切片脫蠟至水。 (3)愛先藍(lán)染液染10~20min。 (4)稍水洗。 (5)核固紅液復(fù)染5~10min。 (6)稍水洗。 (7)常規(guī)脫水、透明,中性樹膠封固。 3.染色結(jié)果 新型隱球菌的莢膜呈藍(lán)色,胞核呈紅色。 |

銅蟲 (小有名氣)
|
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +14 | 勒布朗@ 2026-03-31 | 19/950 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 805600專碩材料與化工348分求調(diào)劑 +4 | 上學(xué)啦! 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
[考研] 261求調(diào)劑 +3 | 明仔· 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料工程290求調(diào)劑 +18 | Youth_ 2026-03-30 | 18/900 |
|
|
[考研] 生物與醫(yī)藥考研調(diào)劑 +5 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
[考研] 0710生物學(xué)考研調(diào)劑 +3 | 李多米lee. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
[考研] 085600,材料與化工321分,求調(diào)劑 +11 | 大饞小子 2026-03-27 | 11/550 |
|
|
[考研] 安徽大學(xué)專碩生物與醫(yī)藥專業(yè)(086000)324分,英語已過四六級,六級521,求調(diào)劑 +10 | 美味可樂雞翅 2026-03-26 | 12/600 |
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +7 | 曲聽筠 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
[考研] 一志愿南師大0703化學(xué) 275求調(diào)劑 +5 | Ripcord上岸 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
[考研] 合肥區(qū)域性重點(diǎn)一本招收調(diào)劑 +4 | 6266jl 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
[考研] 346求調(diào)劑 一志愿070303有機(jī)化學(xué) +11 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +6 | 賣個關(guān)子吧 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | 呼吸都是減肥 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
[考研] 323分 食品與營養(yǎng)調(diào)劑 +3 | 嘿ooo 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
[考研] 08工科求調(diào)劑286 +5 | tgs_001 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
[有機(jī)交流]
10+3
|
kaobao456 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +17 | 田洪有 2026-03-26 | 18/900 |
|
|
[考研] 一志愿中南大學(xué)化學(xué)0703總分337求調(diào)劑 +6 | niko- 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-26 | 9/450 |
|