 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1577 | 回復(fù): 7 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
想要證明一個(gè)啟動(dòng)子是受到氧氣調(diào)控，怎么設(shè)計(jì)基因敲除？ 已有1人參與
|
||
|
我們做微生物，想證明一株叫做HS01的嗜水氣單胞菌其中一個(gè)啟動(dòng)子受到氧氣刺激而調(diào)控（我們知道這個(gè)啟動(dòng)子的序列），即有氧氣的時(shí)候它就會(huì)調(diào)控后續(xù)基因表達(dá)，沒有氧氣就不表達(dá)。 我們應(yīng)該證明哪幾點(diǎn)？ 一：要證明氧氣可以調(diào)控這個(gè)啟動(dòng)子 二：要證明氧氣不是直接作用在下游序列上，而是啟動(dòng)子上。 我們打算這么做： 1：我們想把這段啟動(dòng)子序列導(dǎo)入到質(zhì)粒當(dāng)中，讓它調(diào)控另一段基因的表達(dá)，比如某個(gè)顯色的基因，看看是不是這個(gè)顯色基因也受氧氣影響，那就證明了這段啟動(dòng)序列是受氧氣調(diào)控的。即證明第一點(diǎn)。 2：我們想用一個(gè)新的啟動(dòng)子，比如受光控制的啟動(dòng)子，與原有的啟動(dòng)子的上下游序列構(gòu)建一個(gè)質(zhì)粒，即用新啟動(dòng)子代替原來的，然后將這個(gè)質(zhì)粒導(dǎo)入到已敲除原啟動(dòng)序列的HS01當(dāng)中，得到一株新的敲除菌。新菌不再受氧氣調(diào)控，而是受光調(diào)控，這樣就證明了氧氣是作用在啟動(dòng)子上，而不是下游序列上。證明第二點(diǎn)。 有個(gè)國外實(shí)驗(yàn)室給我們回郵件，說可以這么做，我覺得這只能證明我所說的第一點(diǎn)，各位看看： Alternatively, we can structure a donor plasmid with following sequence(也就是構(gòu)建一個(gè)換掉啟動(dòng)子序列的質(zhì)粒). and a crispr/cas9 palsmid targets to your regulator. Then ,you transform the plasmids into Aeromonas hydrophila strain s1. You will achieve the purpose of the experiment. 我說的方案需要構(gòu)建兩株突變菌，我說的那樣做對(duì)嗎？有必要那么麻煩嗎？ 外國實(shí)驗(yàn)室這樣做，只需要構(gòu)建一株突變菌，對(duì)嗎？能證明氧氣的調(diào)控嗎？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有125人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有2人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 談?wù)勎覍?duì)轉(zhuǎn)基因的看法吧
已經(jīng)有95人回復(fù)
- 達(dá)芬奇五年沉浮-嵌入式處理器架構(gòu)之爭(zhēng)決戰(zhàn)2012[轉(zhuǎn)]
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 【轉(zhuǎn)載】結(jié)合個(gè)人經(jīng)歷和體會(huì)也談?wù)剣鴥?nèi)博士學(xué)位以及應(yīng)聘國外教職
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【經(jīng)驗(yàn)分享】新/語/絲文章：國內(nèi)外博士學(xué)位、應(yīng)聘教職、國內(nèi)外學(xué)術(shù)差距
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 基金申請(qǐng)策略和技巧（中大）
已經(jīng)有21人回復(fù)
kuaile5420
專家顧問 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 72 (初中生)
- 貴賓: 0.232
- 金幣: 10312.4
- 散金: 124
- 紅花: 15
- 帖子: 1068
- 在線: 221.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1836826
- 注冊(cè): 2012-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
- 管轄: 生物醫(yī)藥區(qū)
8樓2014-08-19 21:38:58
kuaile5420
專家顧問 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 72 (初中生)
- 貴賓: 0.232
- 金幣: 10312.4
- 散金: 124
- 紅花: 15
- 帖子: 1068
- 在線: 221.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1836826
- 注冊(cè): 2012-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
- 管轄: 生物醫(yī)藥區(qū)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流！ 2014-08-09 21:27:52
wuyundang: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2014-08-12 22:07:18
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流！ 2014-08-09 21:27:52
wuyundang: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2014-08-12 22:07:18
| 您好，個(gè)人感覺您設(shè)計(jì)的第二個(gè)敲除菌意義不大，感覺重新梳理一下實(shí)驗(yàn)思路會(huì)好一些。首先我們要明確的是氧氣是直接作用在啟動(dòng)子上還是通過相關(guān)途徑產(chǎn)生某種物質(zhì)來與啟動(dòng)子結(jié)合進(jìn)行基因調(diào)控？這個(gè)貌似沒有相關(guān)文獻(xiàn)記載氧氣可以直接作用在啟動(dòng)子上，因此是通過相關(guān)途徑產(chǎn)生某種物質(zhì)來進(jìn)行基因調(diào)控的。因此要確定的是氧氣作用后產(chǎn)生了那個(gè)物質(zhì)。希望這樣回答會(huì)對(duì)您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)有所幫助。期待進(jìn)一步交流。 |
2樓2014-08-08 17:48:16
3樓2014-08-09 09:31:00
kuaile5420
專家顧問 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 72 (初中生)
- 貴賓: 0.232
- 金幣: 10312.4
- 散金: 124
- 紅花: 15
- 帖子: 1068
- 在線: 221.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1836826
- 注冊(cè): 2012-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
- 管轄: 生物醫(yī)藥區(qū)
★ ★ ★ ★ ★
wuyundang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-10 10:27:05
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-20 09:50:19
wuyundang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-10 10:27:05
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-20 09:50:19
|
第一個(gè)敲出菌是有意義的啊，可以通過該顯色基因的表達(dá)來確定是否氧氣對(duì)該啟動(dòng)子進(jìn)行了調(diào)控。不知道你用的是那個(gè)菌，這里有篇文章，希望對(duì)您有幫助。http://wenku.baidu.com/view/1166b559c850ad02de8041df.html 里面提到了氧化應(yīng)激反應(yīng)對(duì).http://wenku.baidu.com/view/d1d322d59b89680203d82579.html ,這個(gè)Ppt中也說到了氧化應(yīng)激反應(yīng)對(duì)基因影響效應(yīng)。你可以查一下相關(guān)的文獻(xiàn)確定氧氣對(duì)啟動(dòng)子調(diào)控機(jī)理，然后進(jìn)行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
wuyundang4樓2014-08-10 10:18:27
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 295材料工程專碩求調(diào)劑 +8 | 1428151015 2026-03-27 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +16 | 超級(jí)伊昂大王 2026-03-24 | 17/850 |
|
|
[考研] 化學(xué)0703 調(diào)劑 306分 一志愿211 +8 | 26要上岸 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程調(diào)劑 +8 | 深V宿舍吧 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南大學(xué)化學(xué)0703總分337求調(diào)劑 +6 | niko- 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +4 | 小卡不卡. 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +15 | Micky11223 2026-03-25 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +6 | Amber00 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +5 | 愛羈絆 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑 +4 | 小張zxy張 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 320分，材料與化工專業(yè)，求調(diào)劑 +9 | 一定上岸aaa 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +5 | 舊吢 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 蘆lty 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +7 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 安徽大學(xué)專碩生物與醫(yī)藥專業(yè)(086000)324分，英語已過四六級(jí)，六級(jí)521，求調(diào)劑 +4 | 美味可樂雞翅 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085601 材料工程 313分 求調(diào)劑 +5 | Ong3 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 304材料求調(diào)劑
+4
|
鐘llll 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化工專碩求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4 | 鮮當(dāng)牛 2026-03-24 | 4/200 |
|