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蛋白酶K處理異常 已有1人參與
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ChIP試驗(yàn)中，為啥加入酚/氯仿/異丙醇提取DNA時，靜置分層很慢，而且13200rpm*15min后上層水相呈乳白色渾濁呢？我覺得蛋白酶K消化有問題，但是不知道那一步不正確，請各位幫我看看哇！ 步驟：加入Elution Buffer（170ddH2O+10ul20%SDS+20ul%NaHCO3=200ul)洗脫beads后，先加入8ul 5M NaCl 65攝氏度解交聯(lián)6h，再加入4ul0.5ulEDTA+8ulTris-HCl+1ul Proteinase K，45攝氏度處理2h 。之后就加入酚/氯仿/異丙醇了。蛋白酶K是用10mg粉末加入到50mM Tris-HCl，10mMCaCl2的緩沖液（1ml）中配置的，濃度是10mg/ml。  |
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鐵蟲 (初入文壇)
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2樓2020-05-30 03:56:03
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