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小片段基因文庫(kù)構(gòu)建中載體的選擇
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| 各位蟲(chóng)友：我現(xiàn)在需要構(gòu)建一個(gè)細(xì)菌的基因文庫(kù)�；蚱慰刂圃�2-6kb之間，是采用目標(biāo)酶的活性進(jìn)行篩選，篩選過(guò)程是在96孔板中進(jìn)行的。我在一些文獻(xiàn)中看到很多人構(gòu)建文庫(kù)都是采用puc19作為載體，然后轉(zhuǎn)化到DH5α中，在平板上根據(jù)酶活篩選出目標(biāo)克隆子。我的問(wèn)題是：PUC19是克隆載體，以他為載體能表達(dá)出酶嗎？以puc19為載體固然是好，它能進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，這樣可以節(jié)省很大一部分工作量，但是我實(shí)在96孔板中以酶活為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)篩，能用puc19載體嗎？ |
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2樓2012-11-02 12:38:02
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