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小片段基因文庫構(gòu)建中載體的選擇
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| 各位蟲友:我現(xiàn)在需要構(gòu)建一個細菌的基因文庫;蚱慰刂圃2-6kb之間,是采用目標酶的活性進行篩選,篩選過程是在96孔板中進行的。我在一些文獻中看到很多人構(gòu)建文庫都是采用puc19作為載體,然后轉(zhuǎn)化到DH5α中,在平板上根據(jù)酶活篩選出目標克隆子。我的問題是:PUC19是克隆載體,以他為載體能表達出酶嗎?以puc19為載體固然是好,它能進行藍白斑篩選,這樣可以節(jié)省很大一部分工作量,但是我實在96孔板中以酶活為評價標準篩,能用puc19載體嗎? |

鐵桿木蟲 (著名寫手)

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