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小片段基因文庫構(gòu)建中載體的選擇
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| 各位蟲友:我現(xiàn)在需要構(gòu)建一個(gè)細(xì)菌的基因文庫;蚱慰刂圃2-6kb之間,是采用目標(biāo)酶的活性進(jìn)行篩選,篩選過程是在96孔板中進(jìn)行的。我在一些文獻(xiàn)中看到很多人構(gòu)建文庫都是采用puc19作為載體,然后轉(zhuǎn)化到DH5α中,在平板上根據(jù)酶活篩選出目標(biāo)克隆子。我的問題是:PUC19是克隆載體,以他為載體能表達(dá)出酶嗎?以puc19為載體固然是好,它能進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,這樣可以節(jié)省很大一部分工作量,但是我實(shí)在96孔板中以酶活為評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)篩,能用puc19載體嗎? |


鐵桿木蟲 (著名寫手)
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