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小片段基因文庫構(gòu)建中載體的選擇
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| 各位蟲友：我現(xiàn)在需要構(gòu)建一個細(xì)菌的基因文庫。基因片段控制在2-6kb之間，是采用目標(biāo)酶的活性進(jìn)行篩選，篩選過程是在96孔板中進(jìn)行的。我在一些文獻(xiàn)中看到很多人構(gòu)建文庫都是采用puc19作為載體，然后轉(zhuǎn)化到DH5α中，在平板上根據(jù)酶活篩選出目標(biāo)克隆子。我的問題是：PUC19是克隆載體，以他為載體能表達(dá)出酶嗎？以puc19為載體固然是好，它能進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，這樣可以節(jié)省很大一部分工作量，但是我實在96孔板中以酶活為評價標(biāo)準(zhǔn)篩，能用puc19載體嗎？ |
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9樓2012-11-06 23:58:55
克隆大蝦
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2樓2012-11-02 12:38:02
3樓2012-11-05 12:04:53
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4樓2012-11-05 12:21:10
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