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[交流]
生物SEM樣品交流 已有2人參與
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細(xì)胞，細(xì)菌的電鏡樣品越來(lái)越多的人涉及，不知道有沒有同行可以交流一下。特別是樣品冷凍干燥的一些技巧。 wenzi_m001.jpg wenzi_m002.jpg wenzi_m005.jpg wenzi_m008.jpg wenzi_m016.jpg |
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snoopytbw
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4樓2015-06-09 09:56:47
snoopytbw
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我做過(guò)細(xì)菌的SEM 首先，前期處理非常關(guān)鍵。一般情況下，細(xì)菌要做SEM，都是觀察其在某表面的分布形態(tài)以及結(jié)構(gòu)變化等，那么前期固定過(guò)程非常關(guān)鍵。 傳統(tǒng)的固定方法是使用0.25%的戊二醛預(yù)固定30分鐘，再通過(guò)2.5%戊二醛固定3-6小時(shí)，利用梯度濃度的酒精進(jìn)行脫水，再進(jìn)行二氧化碳臨界點(diǎn)干燥或非真空冷干后上樣。一般需要進(jìn)行噴金或噴碳處理后才能進(jìn)行SEM分析。 但是有些樣品中戊二醛會(huì)與表界面物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，不適合該方法進(jìn)行預(yù)處理，如果戊二醛固定后脫水，會(huì)導(dǎo)致電鏡下白色絮狀物沉淀過(guò)多。那么這樣的樣品做SEM則需要改用乙酸乙酯進(jìn)行固定，且酒精脫水應(yīng)盡可能的減少，否則容易導(dǎo)致樣品丟失。如果樣品在真空中易變性的話，需要進(jìn)行環(huán)境SEM分析，也就是低真空環(huán)境的SEM。（有環(huán)掃儀器的話才能做） |
2樓2014-08-12 12:17:28
kali509
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3樓2015-06-08 17:40:37
kali509
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5樓2015-06-09 13:57:59
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