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[求助]
southern blot 點(diǎn)雜交一直不出現(xiàn)顯色點(diǎn) 已有1人參與
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探針濃度為25 ng/ml。膜是尼龍膜。 預(yù)雜交液：5X SSC,0.02%SDS,1%Blocking Reagent預(yù)雜交溫度65°，4小時(shí) 在雜交袋里65°恒溫水浴鍋里雜交過夜 試劑盒是BOSTER DIG Random Labeling and Detection Kit I(POD) (for color detection with DAB) 在顯色的時(shí)候尼龍膜上背景有土黃的顏色，然后烘烤干燥后顏色會(huì)明顯變淡。 做了很多次一直沒有結(jié)果  。后來又重新測(cè)了各瓶溶液的pH，發(fā)現(xiàn)pH都不對(duì)了，重新調(diào)了pH再做還是不行。求大神幫助。 |
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vltaober
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 無機(jī)藥物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
| http://www.ebioq.com/openlab/43/0 這個(gè)里面有關(guān)于southern blot的技術(shù)資料問答，可以去逛逛，如果實(shí)在有問題還可以咨詢他們的，我們也在這做過，嗯，棒棒的。 |
3樓2016-07-04 16:30:56
？
2樓2014-08-24 21:19:58
jackyoung
新蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 園藝學(xué)與植物營養(yǎng)學(xué)
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應(yīng)該是顯色劑有問題了吧，拿試劑盒里帶的control做個(gè)點(diǎn)雜看一看，至少要保證抗體到顯色劑都沒有問題再說。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-07-05 08:34:11
ghs25372216
禁蟲 (正式寫手)
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5樓2016-08-10 21:07:45
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