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shen_41745金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白雙向電泳問題咨詢 已有2人參與
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我跑的蛋白雙向電泳蛋白點總是那么少，而且橫向拖尾一直解決不了，哪位大神給點意見啊？ 2D00002.jpg |
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笨蛋娃娃5121
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3樓2014-10-08 15:12:09
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
shen_41745(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-08-25 22:41:45
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shen_41745(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-08-25 22:41:45
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橫向拖尾應(yīng)該是第一向等電聚焦出了問題，一般跑出來的蛋白點是圓的才正常。 你可以從以下幾個方面檢查： 1、第一向8000V或者10000V的電壓有沒有升上去，如果沒有，橫向會出現(xiàn)拖尾或者聚在一起分不開； 2、檢查水化液試劑是否失效，其中Destreak Reagent就是專門用來消除拖尾的； 3、IPG Buffer切記加多，否則影響結(jié)果； 4、第一向上等電聚焦儀的時候檢查膠槽電極是否與電極板貼合緊密，之間是否有雜物（灰塵、水汽） 以上個人見解，僅供參考 |
2樓2014-08-25 22:13:24
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