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[交流]
ELISA試驗(yàn)不顯色，希望得到大家?guī)椭? 已有2人參與
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1) 樣品為魚(yú)肝micorsome，100ul加入ELISA板，每個(gè)樣品三次重復(fù)。 2) 濕盒中，4度冰箱過(guò)夜。 3) 200ul 低鹽緩沖液洗滌，輕微晃動(dòng)洗3次每次5分鐘 4) 5%脫脂奶粉封閉1小時(shí) 5) 200ul 低鹽緩沖液洗滌，輕微晃動(dòng)洗3次每次5分鐘 6) 100ul 一抗，室溫1.5小時(shí) 7) 200ul高鹽緩沖液洗滌，輕微晃動(dòng)洗3次每次5分鐘 8) 100ul 二抗，室溫1.5小時(shí) 9) 200ul高鹽緩沖液洗滌，輕微晃動(dòng)洗3次每次5分鐘 10) 100ul TMB/OPD顯色 30分鐘 11) 1N 硫酸終止反應(yīng) TMB和OPD都已經(jīng)試過(guò)了，均不顯色，我猜測(cè)我試驗(yàn)的問(wèn)題是蛋白沒(méi)有煮過(guò)。希望大家?guī)臀乙幌�，謝謝。 |
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7樓2014-09-01 20:20:48
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
wxy3937: 金幣+8, 謝謝你 2014-09-01 21:30:15
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
wxy3937: 金幣+8, 謝謝你 2014-09-01 21:30:15
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本科學(xué)渣表示一年前做的Elisa，現(xiàn)在忘得差不多了。有幾個(gè)疑問(wèn)，樣本提取多少時(shí)間了？我前一天提取的樣本同樣沒(méi)煮但第二天染出來(lái)了。另外樣本是否-70度保存？是否因保存不善分解？Elisa盒子不是里邊已經(jīng)加了一抗嗎？另外樓主的室溫是37度嗎？建議樓主嚴(yán)格按照盒子帶的說(shuō)明書(shū)操作。(希望樓主多多指教，勿噴) [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
2樓2014-09-01 19:12:56
逍瀟
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
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- 專業(yè): 化學(xué)環(huán)境污染與健康
3樓2014-09-01 19:32:39
4樓2014-09-01 19:55:34
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