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夏天的普洱茶木蟲 (著名寫手)
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[求助]
重組蛋白在BL21(DE3)中表達(dá),存在包涵體 已有3人參與
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| 我的酶在大腸桿菌中表達(dá)后,剛開始表達(dá)酶活很高,SDS-PAGE顯示蛋白在上清液中,后來(lái)某一天酶活突然下降,降到原始酶活的1/3左右,重新轉(zhuǎn)化篩選仍沒有效果,SDS-PAGE顯示上清中的蛋白量減少了,而破碎后的沉淀中存在很多,這應(yīng)該是以包涵體的形式存在吧?每次的發(fā)酵條件都一樣,為什么剛開始沒有而后來(lái)出現(xiàn)了呢?有什么解決方法嗎?希望各位蟲友不吝賜教 |
木蟲 (著名寫手)
木蟲 (著名寫手)
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