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miRNA啟動(dòng)子研究 已有1人參與
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| 請(qǐng)問(wèn)有做過(guò)miRNA啟動(dòng)子研究的嗎？我現(xiàn)在是把miRNA的上游2300bp序列拷貝到一個(gè)沒(méi)有啟動(dòng)子的熒光素酶上游，然后檢測(cè)熒光素酶表達(dá)情況。但是做出來(lái)的結(jié)果是插入序列的跟空載體沒(méi)有什么區(qū)別，下一步該怎么做��？看到有的文獻(xiàn)是拷貝了miRNA上游4000多bp進(jìn)去，我要不要也擴(kuò)大一下長(zhǎng)度試一下？可是如果這樣還是沒(méi)區(qū)別可怎么辦？實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題，我做了陽(yáng)性對(duì)照，將一個(gè)已知有啟動(dòng)子活性的序列插進(jìn)去熒光素酶有很大的增加。求高人解答！急�。〔粍俑屑ぃ。。� |
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6樓2016-05-17 15:42:36
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一般在靶基因的上游2000bp是啟動(dòng)子區(qū)，但是并不是說(shuō)把這2000bp克隆到載體上就能有效果，需要找到轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，在保證含有結(jié)合位點(diǎn)的前提下盡可能截短序列，插到載體里效果才能好 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
7樓2016-05-18 10:36:00
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還有如樓上說(shuō)的是正義鏈還是反義鏈表達(dá)的問(wèn)題，找到相應(yīng)的鏈，再找5’端的啟動(dòng)子區(qū)和轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2016-05-18 10:38:40
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