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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸提取 » 磁珠試劑盒提取細胞中DNA
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freerf新蟲 (小有名氣)
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[求助]
磁珠試劑盒提取細胞中DNA 已有2人參與
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求推薦適合的相應的磁珠提取DNA試劑盒，要求如下： 1.提取動物細胞培養(yǎng)液中的基因組DNA； 2.磁珠粒徑最好為nm級； 3.手提； 4.請指出試劑盒中哪一步去除蛋白質(zhì)、哪一步去除RNA、磁珠洗脫的條件控制~~ 這幾個月一直在摸索中、還是一頭霧水。  謝謝，請大仙指教~~~  |
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 磁珠 |
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zhangyunjing
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【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數(shù) +1
freerf(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+5, 鼓勵回帖交流 2014-09-12 10:39:48
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freerf(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+5, 鼓勵回帖交流 2014-09-12 10:39:48
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你是要研發(fā)磁珠法DNA抽提試劑盒嗎？ 1.關于抽提的細胞中的基因組DNA，首先你要找到合適的裂解液。 2. 磁珠粒徑不是關鍵，關鍵的是你選的磁珠磁吸附力好，而且結(jié)合DNA分子的特異性強，結(jié)合時間短，一般用于核酸提取的磁珠的粒徑在1 uM左右。 3. 手提的話需要磁力架，生工有賣的，很便宜 4. 去除蛋白、RNA等要在磁珠結(jié)合DNA步驟之前，否則磁珠也會結(jié)合RNA分子 5. 關于磁珠洗脫條件的控制，因磁珠而異，不同的磁珠洗脫條件差別還是很大的 |
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freerf
4樓2014-09-12 10:14:59
zhangyunjing
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freerf: 金幣+30, ★★★很有幫助, 謝謝~~我周一咨詢下商家 2014-09-13 20:42:22
freerf: 金幣+30, ★★★很有幫助, 謝謝~~我周一咨詢下商家 2014-09-13 20:42:22
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1. 我用的是上海生工的磁珠法動物組織DNA抽提試劑盒，產(chǎn)品編號是SK8721。 2. 關于你提到的無需洗脫直接以磁珠為模板，進行下一步實驗，我們用過生工的磁珠法質(zhì)粒抽提試劑盒，磁珠經(jīng)過洗滌和干燥之后，直接加入PCR反應體系所需要的組分，然后以磁珠為模板，進行PCR，確實能夠擴增出目的條帶，而且條帶挺亮的。 3. 不知道你用下游做什么實驗。 4.關于洗脫條件的問題，不同的磁珠洗脫條件有差別的，這與磁珠的性質(zhì)有關，有的磁珠需要高溫水浴洗脫，洗脫過程中間或混勻；有的磁珠常溫洗脫效率也很好，就看你用的是哪家公司的磁珠了。 5. 關于你提到的DNA得率低的問題，如果是你自己買的磁珠做的話，需要自己摸索最佳的結(jié)合條件，包括結(jié)合液的組分和結(jié)合時間，如果結(jié)合效率很低的話，你的得率自然也很低，建議你買成熟的磁珠法試劑盒，自己摸索需要很久的時間的。 6. 關于磁珠法DNA提取建議你打電話到生工咨詢一下，他們對這方面的研究還是挺深入的。 |
10樓2014-09-12 16:20:41
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7樓2014-09-12 10:36:53
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8樓2014-09-12 16:01:51
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