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大腸桿菌RED基因敲除4個月總是得不到陽性克隆，求大神指導�。�！
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最近一直在做大腸桿菌的基因敲除，可是4個月一個基因都沒敲下來，總是電轉后得不到陽性克隆，也就是說抗性片段沒有整合到染色體上，卡在這一步�。�！ 制取的片段應該沒有問題，感受態(tài)制作是大腸桿菌K12（PKD46），電擊條件：2.5KV,5ms,2mm電轉杯，電擊后37度后培養(yǎng)1.5小時涂板，可是長出的單菌落都是假陽性的。 |
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2樓2014-10-21 09:55:17
3樓2014-10-27 20:21:25
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