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zdwxxw

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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[求助] 重組蛋白為什么分子量變?yōu)樵瓉?lái)的3倍了？已有5人參與

如題，原來(lái)的蛋白表達(dá)出來(lái)是15kda左右，跟理論值一致，為什么改變了一些密碼子之后，表達(dá)出來(lái)的東西是45kda左右？關(guān)鍵是生物活性跟原來(lái)的一樣，是不是變成了二聚體或者三聚體了？有木有遇到類(lèi)似情況的蟲(chóng)友，怎么破？

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踏踏實(shí)實(shí)做好自己，其他的事與你無(wú)關(guān)。

1樓 2014-09-28 16:58:38

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bio_sci

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三聚體，一般是這個(gè)原因，sds有時(shí)不能完全打開(kāi)四級(jí)結(jié)構(gòu)的

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3樓2014-09-28 19:00:07

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langzian

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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zdwxxw: 金幣+5, ★有幫助, 恩呢，我看看 2014-09-29 20:50:43

SDS_PAGE 是不會(huì)有二聚體的，除非二硫鍵，你可以變性電泳試試

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江山

2樓2014-09-28 18:50:34

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ccandcc

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進(jìn)樣之前多煮沸一會(huì)，我覺(jué)得是沒(méi)完全打開(kāi)

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4樓2014-09-29 10:22:06

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估計(jì)是你優(yōu)化密碼子的時(shí)候搞錯(cuò)了，氨基酸突變成有糖鏈的了。

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流星來(lái)時(shí)我許了個(gè)愿，愿我有吃有喝還有舒服的豬圈。討厭發(fā)帖前不搜索論壇重復(fù)發(fā)帖和僅把論壇當(dāng)解決問(wèn)題工具，久不看論壇一來(lái)就提問(wèn)者，寧棄EPI和VIP也不回帖。

5樓2014-10-02 00:17:35

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