我聽五月天

木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
金幣: 1374.1
散金: 790
紅花: 5
帖子: 547
在線: 127.8小時(shí)
蟲號(hào): 2001981
注冊(cè): 2012-09-15
性別: GG
專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

[求助] 用HPLC監(jiān)控紫杉醇的DMSO溶液濃度會(huì)不會(huì)隨時(shí)間變化，應(yīng)該用峰面積還是峰高作參考？已有7人參與

實(shí)驗(yàn)需要用的紫杉醇DMSO溶液，每次實(shí)驗(yàn)時(shí)稀釋使用，為了保證溶液質(zhì)量，每次使用時(shí)用HPLC檢測(cè)紫杉醇濃度。
查了文獻(xiàn)后決定條件定為
56微克/毫升的溶液進(jìn)樣5微升;
1毫升每分鐘，乙腈/水=35/65;
25-40度不控制溫度;
檢測(cè)器227納米。
文獻(xiàn)里10分鐘以后出峰，我做的2.6分鐘出峰，峰高接近3000，面積5.7*e4。連續(xù)進(jìn)了三次樣，結(jié)果一致性很好。
緊接著沒有平衡就換成乙腈/水=25/75（好久不做液相了，為了讓他晚點(diǎn)兒出峰竟然。。。）進(jìn)樣一次，2.6分鐘出峰，峰高接近3000，面積4.0*e4。
。。。。。。。。。。。。
過了一星期多，用乙腈/水=35/65，2.6分鐘出峰，峰高接近3000，面積4.7*e4.
額。。。醉了，不知道怎么判定濃度了。

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

303求調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)
一志愿武理085500機(jī)械專業(yè)總分300求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
材料學(xué)求調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)
考研調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
281求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
0805 316求調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)
085601求調(diào)劑總分293英一數(shù)二已經(jīng)有3人回復(fù)
08工學(xué)調(diào)劑已經(jīng)有17人回復(fù)
340求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
311求調(diào)劑已經(jīng)有3人回復(fù)

» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

安捷倫和島津HPLC峰面積和峰高怎么換算? 已經(jīng)有11人回復(fù)
標(biāo)準(zhǔn)品HPLC檢測(cè)峰面積變化求教已經(jīng)有17人回復(fù)
高效液相色譜-紫外檢測(cè)，可以用峰高和濃度得到線性擬合直線嗎？已經(jīng)有12人回復(fù)
求助：HPLC標(biāo)品和樣品在相同的出峰時(shí)間出來了兩個(gè)峰已經(jīng)有19人回復(fù)
高效液相色譜倒峰問題已經(jīng)有17人回復(fù)
HPLC 流動(dòng)相比例差別較大，但出峰的保留時(shí)間卻不變，是怎么回事？已經(jīng)有18人回復(fù)
隨著時(shí)間推移，同一樣品的峰面積越來越小已經(jīng)有16人回復(fù)
HPLC標(biāo)準(zhǔn)溶液配制已經(jīng)有7人回復(fù)
HPLC中進(jìn)樣力度對(duì)出峰時(shí)間的影響已經(jīng)有7人回復(fù)
HPLC外標(biāo)法怎么計(jì)算？已經(jīng)有9人回復(fù)
HPLC出峰面積不一樣已經(jīng)有9人回復(fù)
流動(dòng)相流速加大一倍，會(huì)不會(huì)對(duì)出峰面積有影響？已經(jīng)有13人回復(fù)
HPLC，標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制已經(jīng)有16人回復(fù)
流動(dòng)相不變，樣品濃度不變，溶劑改變，峰面積會(huì)改變嗎？已經(jīng)有17人回復(fù)
HPLC分析樣品峰面積出現(xiàn)問題了。怎么解決？？已經(jīng)有6人回復(fù)
HPLC中關(guān)于峰面積積分問題已經(jīng)有19人回復(fù)
【求助】HPLC有鬼峰出現(xiàn)，急尋解決方案已經(jīng)有62人回復(fù)
【求助】同濃度液相峰面積不同已經(jīng)有17人回復(fù)
【求助】為什么點(diǎn)板有一個(gè)明顯的點(diǎn)，而測(cè)HPLC沒有峰，已經(jīng)有17人回復(fù)

為愛而生

1樓 2014-10-12 08:38:48

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

回帖支持 ( 顯示支持度最高的前 50 名 )

klicking

至尊木蟲 (著名寫手)

ACI: 9
應(yīng)助: 923 (博后)
貴賓: 0.652
金幣: 19319.5
散金: 30
紅花: 149
沙發(fā): 1
帖子: 2337
在線: 513.3小時(shí)
蟲號(hào): 1426293
注冊(cè): 2011-10-03
性別: GG
專業(yè): 藥物分析

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

樓主好估計(jì)你三次觀察到的峰都是溶劑峰，不可能是紫杉醇的峰，在你的條件下出峰時(shí)間不會(huì)這么早的，除非是UPLC，HPLC一般會(huì)控制出峰時(shí)間在3分鐘以后，我做的一般控制在5分鐘左右以后；建議樓主，運(yùn)行時(shí)間延長(zhǎng)（柱子短可以走到25分鐘試試看，長(zhǎng)柱子建議走40分鐘以上）試試看，尤其是色譜柱是250mm時(shí)，最好用個(gè)梯度，最后把乙腈比例調(diào)為90%走了看看。

贊一下(3人)

回復(fù)此樓

歸零

2樓2014-10-12 09:02:41

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

klicking

至尊木蟲 (著名寫手)

ACI: 9
應(yīng)助: 923 (博后)
貴賓: 0.652
金幣: 19319.5
散金: 30
紅花: 149
沙發(fā): 1
帖子: 2337
在線: 513.3小時(shí)
蟲號(hào): 1426293
注冊(cè): 2011-10-03
性別: GG
專業(yè): 藥物分析

補(bǔ)充一個(gè)問題，定量肯定使用峰面積，用峰高的很少，峰高要求峰的對(duì)稱性在0.95 - 1.05之間，這個(gè)要求有點(diǎn)高了。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

歸零

3樓2014-10-12 09:25:50

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

liwentao2010

榮譽(yù)版主 (文壇精英)

山濤

專家經(jīng)驗(yàn): +925
ACI: 8
應(yīng)助: 1892 (講師)
貴賓: 9.653
金幣: 66833.1
散金: 19465
紅花: 295
沙發(fā): 38
帖子: 12535
在線: 1645.7小時(shí)
蟲號(hào): 1135679
注冊(cè): 2010-10-31
專業(yè): 催化化學(xué)
管轄: 催化

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
我聽五月天: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-10-12 11:08:37

建議樓主重新考慮一下流動(dòng)相配制，前幾分鐘雜峰比較多，干擾性強(qiáng)，最好出峰時(shí)間再向后延遲一些。此外，峰高或峰面積都可以作為標(biāo)準(zhǔn)判斷，比如UV依賴于吸光度值等，但是這與物質(zhì)種類有關(guān)，若是峰型好，規(guī)則而峰尖，都可以，反之最好選擇積分面積比較好一些。（個(gè)人看法，僅供參考）

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

加油！

4樓2014-10-12 09:53:36

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

yemu159

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 527.2
散金: 22
紅花: 1
帖子: 57
在線: 53.1小時(shí)
蟲號(hào): 3412726
注冊(cè): 2014-09-12
性別: GG
專業(yè): 植物分類學(xué)

DMSO不能做液相的溶劑，2.6分鐘可能是DMSO的溶劑峰。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

高山仰止，厚德載物

20樓2014-10-14 09:26:38

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

普通回帖

我聽五月天

木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
金幣: 1374.1
散金: 790
紅花: 5
帖子: 547
在線: 127.8小時(shí)
蟲號(hào): 2001981
注冊(cè): 2012-09-15
性別: GG
專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

引用回帖:

4樓: Originally posted by liwentao2010 at 2014-10-12 09:53:36
建議樓主重新考慮一下流動(dòng)相配制，前幾分鐘雜峰比較多，干擾性強(qiáng)，最好出峰時(shí)間再向后延遲一些。此外，峰高或峰面積都可以作為標(biāo)準(zhǔn)判斷，比如UV依賴于吸光度值等，但是這與物質(zhì)種類有關(guān)，若是峰型好，規(guī)則而峰尖，都 ...

跟我在其他地方看到的說法一樣！謝謝。峰型不尖

贊一下

回復(fù)此樓

為愛而生

5樓2014-10-12 11:09:42

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

我聽五月天

木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
金幣: 1374.1
散金: 790
紅花: 5
帖子: 547
在線: 127.8小時(shí)
蟲號(hào): 2001981
注冊(cè): 2012-09-15
性別: GG
專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

引用回帖:

2樓: Originally posted by klicking at 2014-10-12 09:02:41
樓主好估計(jì)你三次觀察到的峰都是溶劑峰，不可能是紫杉醇的峰，在你的條件下出峰時(shí)間不會(huì)這么早的，除非是UPLC，HPLC一般會(huì)控制出峰時(shí)間在3分鐘以后，我做的一般控制在5分鐘左右以后；建議樓主，運(yùn)行時(shí)間延長(zhǎng)（柱子 ...

謝謝！我用的250mm柱子。我前面提到了連續(xù)進(jìn)樣四次的，每次都是走了10分鐘多，沒有出現(xiàn)別的峰。。。也是不能說明這是紫杉醇�。�？

我再試試

贊一下

回復(fù)此樓

為愛而生

6樓2014-10-12 11:18:11

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

klicking

至尊木蟲 (著名寫手)

ACI: 9
應(yīng)助: 923 (博后)
貴賓: 0.652
金幣: 19319.5
散金: 30
紅花: 149
沙發(fā): 1
帖子: 2337
在線: 513.3小時(shí)
蟲號(hào): 1426293
注冊(cè): 2011-10-03
性別: GG
專業(yè): 藥物分析

引用回帖:

6樓: Originally posted by 我聽五月天 at 2014-10-12 11:18:11
謝謝！我用的250mm柱子。我前面提到了連續(xù)進(jìn)樣四次的，每次都是走了10分鐘多，沒有出現(xiàn)別的峰。。。也是不能說明這是紫杉醇�。�？

我再試試...

是的，把把運(yùn)行時(shí)間延長(zhǎng)一下看看，我看文獻(xiàn)在5-25分鐘出峰，流動(dòng)相有用到80比例的

贊一下

回復(fù)此樓

歸零

7樓2014-10-12 11:21:00

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

archbishop

禁蟲 (職業(yè)作家)

ACI: 2
應(yīng)助: 190 (高中生)
貴賓: 3.213
金幣: 13682.5
散金: 5394
紅花: 150
沙發(fā): 5
帖子: 4552
在線: 1148.3小時(shí)
蟲號(hào): 792812
注冊(cè): 2009-06-12
性別: GG
專業(yè): 色譜分析
管轄: 分析

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

用峰面積作為判定的標(biāo)準(zhǔn)。你這種情況建議使用梯度洗脫。

贊一下

回復(fù)此樓

雲(yún)幕低垂映桂子，江月留白問柳心。

8樓2014-10-12 13:28:13

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

我聽五月天

木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
金幣: 1374.1
散金: 790
紅花: 5
帖子: 547
在線: 127.8小時(shí)
蟲號(hào): 2001981
注冊(cè): 2012-09-15
性別: GG
專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理

內(nèi)容已刪除

回復(fù)此樓

為愛而生

9樓2014-10-12 14:35:01

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

klicking

至尊木蟲 (著名寫手)

ACI: 9
應(yīng)助: 923 (博后)
貴賓: 0.652
金幣: 19319.5
散金: 30
紅花: 149
沙發(fā): 1
帖子: 2337
在線: 513.3小時(shí)
蟲號(hào): 1426293
注冊(cè): 2011-10-03
性別: GG
專業(yè): 藥物分析

內(nèi)容已刪除

回復(fù)此樓

歸零

10樓2014-10-12 14:58:29

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]	作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +8	A-哆啦Z夢(mèng) 2026-03-23	13/650	2026-03-24 21:05 by greychen00
[考研] 07化學(xué)280分求調(diào)劑 +6	722865 2026-03-23	6/300	2026-03-24 20:58 by allen-yin
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6	小羊睡著了? 2026-03-23	9/450	2026-03-24 20:21 by 小羊睡著了?
[考研] 0854人工智能方向招收調(diào)劑 +3	章小魚567 2026-03-24	3/150	2026-03-24 19:46 by zhouxuan..
[考研] 081700 調(diào)劑 267分 +9	迷人的哈哈 2026-03-23	9/450	2026-03-24 11:58 by 544594351
[考研] 291求調(diào)劑 +8	hhhhxn.. 2026-03-23	8/400	2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 361求調(diào)劑 +3	Glack 2026-03-22	3/150	2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！ +4	酥酥魚.. 2026-03-21	4/200	2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +4	幸運(yùn)的醬醬 2026-03-22	5/250	2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項(xiàng)目，四級(jí)已過 +6	幸運(yùn)哩哩 2026-03-22	10/500	2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +5	困困困困坤坤 2026-03-20	6/300	2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 尋找調(diào)劑 +4	倔強(qiáng)芒? 2026-03-21	4/200	2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +6	CX 330 2026-03-21	6/300	2026-03-22 15:25 by 無懈可擊111
[考研] 材料 271求調(diào)劑 +5	展信悅_ 2026-03-21	5/250	2026-03-21 17:29 by 學(xué)員8dgXkO
[考研] 求調(diào)劑 +3	白QF 2026-03-21	3/150	2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 材料學(xué)學(xué)碩080502 337求調(diào)劑-一志愿華中科技大學(xué) +4	順順順mr 2026-03-18	5/250	2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境專碩，總分308求調(diào)劑 +3	墨墨漠 2026-03-18	3/150	2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 317求調(diào)劑 +5	申子申申 2026-03-19	9/450	2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有機(jī)化學(xué)，求調(diào)劑 +3	小木蟲200408204 2026-03-18	3/150	2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4	我不是一根蔥 2026-03-18	4/200	2026-03-19 09:11 by 浮云166