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vanorazhao

鐵蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
金幣: 79.7
帖子: 30
在線: 19.8小時(shí)
蟲號: 2588290
注冊: 2013-08-08
性別: MM
專業(yè): 色譜分析

[求助] HPLC 測 FB1 時(shí)遇到的問題(延長保留時(shí)間)

我遇到了一個(gè)關(guān)于HPLC 測 FB1 時(shí)遇到的問題，望解答：
我使用的流動(dòng)相是甲醇：0.1M NaH2PO4 = 77:23 ，ph = 3.3；發(fā)射波長為335nm，激發(fā)波長為440；柱溫為30度；進(jìn)樣量為20ul，流速為1ml/min。測得結(jié)果顯示出峰時(shí)間為3.7min左右，之前幾次檢測的出峰時(shí)間是4.0min左右。由于出峰時(shí)間過早，我通過改變流動(dòng)相的比例來延長保留時(shí)間，結(jié)果當(dāng)甲醇：0.1M NaH2PO4 = 67:33時(shí)，在3.7min左右出現(xiàn)的是雙峰（連在一起的）；當(dāng)甲醇：0.1M NaH2PO4 = 57:33 是，分別在4min和6min處出現(xiàn)了一個(gè)峰，用不同濃度的FB1標(biāo)樣檢測時(shí)兩個(gè)出峰時(shí)間對應(yīng)的峰的峰高和峰面積基本相同，無法確定目標(biāo)峰，且用空白樣檢測時(shí)這兩個(gè)位置的峰均大于標(biāo)樣的峰；當(dāng)甲醇：0.1M NaH2PO4 = 40:60 時(shí)，前4min出現(xiàn)了一系列連續(xù)的峰，4min之后也沒有完整的單峰。。。。
請問該怎樣延長保留時(shí)間呢？（我用的是15mm的柱子，實(shí)驗(yàn)室沒有合適的更長的柱子了）
萬分感謝！

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1樓 2014-10-12 19:11:47

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