 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 20 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3334 | 回復: 19 | ||||
[交流]
HPLC測含量摸索流動相的問題
|
||||
| 求助：HPLC同時測定復方中兩種成分，分別是堿性物質(zhì)和酸性物質(zhì)，用過甲醇/乙腈-酸水、乙腈-磷酸鹽流動相，但分離效果不好，請問流動相我接下來該采用什么思路摸索，哪位大神給建議，萬分感激！ |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 我的寶貝 |
» 猜你喜歡
一篇擴散模型的Nature Machine Intelligence論文和Elsevier上的深度學習藥物書籍
已經(jīng)有1人回復
-
2026年申博藥學專業(yè)
已經(jīng)有1人回復
-
藥理學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有89人回復
-
中國藥科大學2026入學博士，藥物合成和設計經(jīng)驗，放射化學及放射醫(yī)學研究
已經(jīng)有25人回復
-
使用MolAICal進行多肽虛擬篩選教程-同樣適用于蛋白質(zhì)和核酸的虛擬篩選
已經(jīng)有1人回復
-
使用MolAICal計算藥物化學過濾器MCFs及MCE-18描述符
已經(jīng)有0人回復
-
使用MolAICal發(fā)現(xiàn)蛋白受體潛在的活性口袋及位點
已經(jīng)有0人回復
-
華理藥學學碩求調(diào)劑，總分324
已經(jīng)有0人回復
-
澳門理工大學人工智能藥物發(fā)現(xiàn)中心招收2026級博士研究生（申請-考核制）
已經(jīng)有10人回復
-
藥學專碩申博
已經(jīng)有1人回復
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- HPLC 流動相比例差別較大，但出峰的保留時間卻不變，是怎么回事？
已經(jīng)有18人回復
- 叔丁醇作為HPLC流動相的問題
已經(jīng)有5人回復
- HPLC測定煙草中農(nóng)藥殘留 前處理問題�。。。。。。。。。。。。。。。�！
已經(jīng)有6人回復
- 二氯甲烷作為HPLC的流動相可行嗎？
已經(jīng)有7人回復
- 高效液相色譜流動相的配置
已經(jīng)有8人回復
- 請問除線磷打HPLC，用C18柱，應該用什么樣的流動相，具體比例如何確定
已經(jīng)有6人回復
- HPLC測定的樣品，pH值應該在什么范圍？
已經(jīng)有17人回復
- HPLC流動相是手動混合還是多通道機器混合比較好
已經(jīng)有21人回復
- 用HPLC的示差檢測器分析甲醇等醇類時流動相是什么
已經(jīng)有3人回復
- 高效液相色譜使用磷酸鹽做流動相時應該注意什么
已經(jīng)有21人回復
- 用HPLC分析螯合劑應該用什么樣的流動相
已經(jīng)有7人回復
- HPLC中流動相的pH問題？
已經(jīng)有41人回復
- 流動相 HPLC級別的不需要在過濾,直接超聲即可
已經(jīng)有12人回復
- HPLC測定苯甲醇和苯甲醛混合樣，如何確定流動相？
已經(jīng)有5人回復
- 【求助】如何摸索高效液相的流動相條件
已經(jīng)有3人回復
- 關(guān)于HPLC中加磷酸和冰醋酸
已經(jīng)有4人回復
- 求助HPLC緩沖鹽濃度對紫外檢測影響的問題
已經(jīng)有18人回復
- 求助：HPLC做有機酸都用的啥流動相呢？？
已經(jīng)有6人回復
- 【交流】HPLC相同條件下，為何我們檢測不出主峰雜質(zhì)？
已經(jīng)有11人回復
- 【求助】HPLC測鹽酸環(huán)丙沙星片該用流動相溶解嗎？
已經(jīng)有4人回復
- 【求助】HPLC分析流動相選擇問題——請教
已經(jīng)有6人回復
- 【交流】HPLC-ELSD流動相選擇的問題
已經(jīng)有17人回復
- 【求助】HPLC，水相做流動相時候，為什么基線波動很大，所以測得結(jié)果重復性很差
已經(jīng)有15人回復
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
持續(xù)創(chuàng)業(yè)者，A8離異男征婚，事業(yè)遇到瓶頸，尋找創(chuàng)業(yè)生活伴侶
+1/463
-
山東征女友，坐標濟南
+1/163
-
散金幣，求基金中標��！
+1/76
-
福建師范大學閩江學者陳巍教授團隊招收2026年化學、化工或材料專業(yè)的學碩6名
+1/38
-
0854電子信息調(diào)劑，閩南師大光電芯片研發(fā)實驗室
+1/36
-
湖北工業(yè)大學 生命科學與健康學院 課題組招收2026級食品/生物方向碩士
+1/31
-
2026年工科碩士調(diào)劑-上海大學全國重點實驗室團隊-材料數(shù)據(jù)挖掘方向-研究生3-5人
+1/30
-
湖南大學微生物結(jié)構(gòu)與功能實驗室2026年計劃招收博士研究生
+1/19
-
麗水學院 材料與能源工程學院 陳江飛老師課題組碩士招生----材料與化工專業(yè)
+1/17
-
【預碩】【預博】青島大學生物醫(yī)藥創(chuàng)新轉(zhuǎn)化
+1/15
-
南京林業(yè)大學-國家級青年人才團隊 招2026級申請考核制博士（合成化學、植物化學方向）
+1/14
-
【緊急】南方科技大學先進成形實驗室接收退役士兵考研調(diào)劑（材料，機械）
+1/10
-
南京林業(yè)大學有機功能分子實驗室博士生招生啟事
+1/8
-
【第三輪招生】澳科大誠招2026年秋季藥劑學碩士研究生（3月31日下午18:00截止）
+1/8
-
歡迎生物與醫(yī)藥、藥學、化學等相關(guān)專業(yè)的同學
+1/7
-
中國科學院過程工程研究所助理研究員（正式職工）和博士后招聘啟事
+1/4
-
Top-88悉尼科技大學數(shù)據(jù)科學/AI 招收2027年入學 校獎 博士生1到2名(國際和本地學生）
+1/2
-
南昌航空大學擬招收飛行器設計或計算流體力學研究方向博士生 1名
+1/2
-
西安交通大學生命學院智能化診療裝備研究中心2026年博士生招生
+1/1
-
125603工業(yè)工程與管理調(diào)劑
+1/1
14樓2013-12-06 18:41:32
2樓2013-12-06 10:39:42
3樓2013-12-06 10:43:00
4樓2013-12-06 10:53:45
5樓2013-12-06 11:28:00
6樓2013-12-06 14:30:14
7樓2013-12-06 16:35:02
8樓2013-12-06 16:37:03
9樓2013-12-06 16:38:20
10樓2013-12-06 16:40:05
11樓2013-12-06 16:40:51
12樓2013-12-06 16:44:40
★ ★
王文靜341: 金幣+2 2013-12-07 19:36:06
王文靜341: 金幣+2 2013-12-07 19:36:06
|
選擇秘訣1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。秘訣2： 三倍規(guī)則：每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中，注意觀察各個峰的分離情況。 秘訣3： 粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)：當分離達到一定程度，應將有機溶劑10%的改變量調(diào)整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變。 1.流動相的性質(zhì)要求 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。 選擇流動相時應考慮以下幾個方面： ①流動相應不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。 ②純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān)，特別是當溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。 ③必須與檢測器匹配。使用UV檢測器時，所用流動相在檢測波長下應沒有吸收，或吸收很小。當使用示差折光檢測器時，應選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。 ④粘度要低(應<2cp)。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓降增加，使分離時間延長。最好選擇沸點在100℃以下的流動相。 ⑤對樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳，樣品會在柱頭沉淀，不但影響了純化分離，且會使柱子惡化。 ⑥樣品易于回收。應選用揮發(fā)性溶劑。 2.流動相的pH值 采用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時，通過調(diào)節(jié)流動相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸，流動相的pH值越小，組分的k值越大，當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在;對弱堿，情況相反。分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液;分析弱堿樣品時，通常在流動相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。 ]注：流動相中加入有機胺可以減弱堿性溶質(zhì)與殘余硅醇基的強相互作用，減輕或消除峰拖尾現(xiàn)象。所以在這種情況下有機胺(如三乙胺)又稱為減尾劑或除尾劑。 (三乙胺triethylamine 氨分子中的氫原子被3個乙基取代的產(chǎn)物。分子式(CH3CH2)3N。易揮發(fā)的無色液體，有氨的氣味。熔點-114.7℃，沸點89.3℃，相對密度 0.7275(20/4℃)。溶于水和乙醇、乙醚等有機溶劑。三乙胺有堿性，與無機酸能生成易溶于水的鹽類�？捎蒒，N- 二乙基乙酰氨與氫化鋁鋰反應制取，也可用乙醇胺進行氣相烷基化反應合成。用于制橡膠硫化促進劑、潤濕劑和殺菌劑等，也可用作溶劑和用于合成四級銨化合物。) 在選擇緩沖液PH值之前，應先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka兩個PH值單位的，有助于獲得好的、尖銳的峰，從HH公式：PH=Pka+log([A-]/[A])得知，溶液PH值高于或低于Pka兩個單位，化合物中99%以一種形式存在，而一種形式存在的化合物才能獲得好的尖銳的峰。顯示的是它的離子形式和中性化合物的轉(zhuǎn)變，苯甲酸的Pka等于4.2，理論上由HH公示得知，當溶液PH值等于 2.2時，99%的苯甲酸以中性化合物存在，PH值等于6.2時99%的苯甲酸以離子形式存在，所以當緩沖液PH值等于2.2時，中性化合物以羧酸形式保留于反相柱，表1列出了一般緩沖液和他們的緩沖范圍。從表1知磷酸鹽和檸檬酸鹽緩沖液能用于PH值等于2.2。 當化合物只有氨基時，緩沖體系的選擇十分簡單，大多數(shù)氨基化合物在PH值小于9時都被質(zhì)子化，所以所有PH值在7或更低的溶液均適合應用，你也許會問水的PH值大約是7，為什么還用緩沖鹽，因為緩沖鹽有助于增加方法的可靠性，以及色譜峰的尖銳性，PH值的降低有助于氨基化合物保留的減弱，減小化合物與硅膠表面硅羥基的作用，而使峰更尖銳，從表1 可值，任何緩沖液均可應用于氨基化合物的分析，但我們認為PH值等于3的磷酸鉀鹽最適合用于氨基化合物的分析。 在上面兩個例子中，PH=3的磷酸鉀鹽都能獲得良好的應用，在一般情況下，它是含羧基和氨基化合物分析中最好的緩沖液，并且我們認為在氨基化合物分析中鉀鹽比鈉鹽更好。 希望對你有用。 |
13樓2013-12-06 17:01:32
15樓2013-12-06 22:40:55
16樓2013-12-07 08:44:27
17樓2013-12-07 08:51:45
18樓2013-12-07 10:27:38
19樓2013-12-07 18:31:34
20樓2013-12-07 19:35:58
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 王文靜341 的主題更新
| 20 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +15 | 于海海海海 2026-03-19 | 15/750 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +14 | 陌の森林 2026-03-18 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +5 | 楓橋ZL 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +3 | llllkkkhh 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學大學 ，080500材料科學與工程學碩，總分289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑，求各位老師收留 +10 | 秋有木北 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | 小材化本科 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +6 | knight344 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +10 | 呼呼呼。。。。 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 280求調(diào)劑 +6 | 咕嚕曉曉 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +4 | 睿08 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Zz版 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | 劉夢微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 求老師收留調(diào)劑 +4 | jiang姜66 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|